動物細胞培養的必需條件

在所有的細胞離體培養中，最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。

⑴血清：動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。

⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃，塑料等作為支持物。

⑶氣體交換：二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養過程中不斷進行調節，不斷維持所需要的氣體條件。

動物細胞培養的培養步驟

注：所有步驟應在無菌無毒的超凈工作臺進行。胰蛋白酶處理時間不宜過長。

取離體的動物組織，器官或細胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成單個細胞，配置形成細胞懸液。

制備動物細胞培養液體培養基（需加入血清，保證無菌無毒），將細胞接種至培養基，放入二氧化碳培養箱中進行初代培養。

當細胞增殖達到一定程度，出現接觸抑制現象時，用胰蛋白酶再次處理，并用細胞懸液吹打貼壁生長的細胞。進行細胞計數。

依照計數結果，分瓶培養，進行傳代培養。獲得細胞系或細胞株。