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試劑配制操作及注意事項匯總來了!

2023-12-11 10:51 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
配制試劑的順序
1.計算
2.稱量或量取
3.溶解
4.轉移
5.洗滌
6.定容
7.搖勻
8.轉移至試劑瓶中
9.標簽

注意事項
1.溶液應用純化水配制,容器應用純化水洗三次以上。
2.溶液要用帶塞(蓋)的試劑瓶盛裝。
3.配制好的試劑應及時盛入試劑瓶,試劑瓶上必須有標明名稱、濃度和配制人,配制日期,復核人,復核日期的標簽,有效期限。
4.溶液儲存時應注意不要使溶液變質。
5.配制硫酸、磷酸、硝酸、鹽酸等溶液時,應把酸倒入水中。
6.防護措施:不能用手直接接觸腐蝕性及有劇毒的溶液,劇毒廢液應作解毒處理,不可直接倒入下水道。
7.應熟悉一些常用溶液的配制方法及常用試劑的性質。

計算
摩爾數的計算
百分比的計算
固體: g/v溶液100mL中含有溶質若干克
液體: v/v溶液100mL中含有溶質若干毫升
試劑分類
按其使用時限來分:即配即用型、短效型、中效型、長效型
按其毒性:無毒、低毒、中等毒性、劇毒
用途:如緩沖液、清洗液、主要組份

純度
有的試劑即使是分析純,純度也只有80%多。

標準品、對照品
1.對照品系指用于鑒別、檢查、含量測定和校正檢定儀器性能的標準物質。
2.標準品系指用于生物檢定、抗生素或生物藥品中含量或效價測定的標準物質,以效價單位(U)表示。
3.國家藥品標準品、對照品系指國家藥品標準中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質和有關物質檢查等標準物質,它是國家藥品標準不可分割的組成部分。

試劑保存
1.注意試劑保存條件:
2.溫度
3.避光
4.濕度
5.酸堿分開存放
6.氧化性和還原性分開放
7.有毒的特殊存放

試劑的溶解度
1.易溶性的:像絕大多數的酸、堿、鹽類試劑,都是易溶性,且一般是水溶性的有機溶劑。
2.難溶性的:有用DMSO來配的。
3.在配制難溶性物質的時候,有的可以加熱,有的可以攪拌,有的可以用超聲。

天平
1.固體配制成試劑時,通常要用到天平。
2.每一個天平都有它的量程范圍。超過或接近最大量程,都是不妥的。
3.放置天平的房間要控制溫濕度,放置天平的臺子要平。
4.水平儀在天平的正后方,視線要與其垂直,視水平儀水泡置于正中之時,即可。要細心、耐心地調好。切忌動作粗暴。
5.預先插電預熱,至電子天平的屏幕顯示穩定后再稱量。
6.配制時,除極少數特殊情況外,一般是從側面加入試劑原料。
7.稱量輔助器具。稱固體一般可用稱量紙,也可用容器;稱液體要用容器。
8.稱量剩余的固體及不小心灑落的液體要清除干凈。固體以毛刷刷去;液體可用吸水紙吸干,并更換紙輕拭。
9.對于固體,一般要盡量以小勺搗至成粉末或小顆粒,再以牛角勺輕抖至稱量紙上或容器中。
10.對吸濕性強的固體,尤其注意環境中的濕度,并迅速完成稱量。
11.對于少數液體需稱量的,多以滴管或移液器來添加。
12.一般倒出來的試劑是不允許倒回原瓶。

稱量的精確度
“稱重”或“量取”的量,其精確度可根據數值的有效數位來確定。
如稱取“0.1g",系指稱取重量可為0.06-0.14g;
稱取“2g",系指稱取重量可為1.5-2.5g;
稱取“2.0g",系指稱取重量可為1.95-2.05g;
稱取"2.00g",系指稱取重量可為1.995-2.005g。

四舍六入五成雙
1.是一種比較精確比較科學的計數保留法,是一種數字修約規則。
2.余位數很多的近似數,當有效位數確定后,其后面多余的數字應該舍去,只保留有效數字最末一位,即“4舍6入5湊偶”這里“四”是指≤4時舍去,"六"是指≥6時進上,"五”指的是根據5后面的數字來定,當5后有數時,舍5入1;當5后無數或為0時,需要分兩種情況來講:①5前為奇數,舍5入1;②5前為偶數,舍5不進。

總結為:
(1)被修約的數字等于或小于4時,該數字舍去;
(2)被修約的數字等于或大于6時,則進位;
(3)被修約的數字等于5時,要看5前面的數字,若是奇數則進位,若是偶數則將5舍掉,即修約后末尾數字都成為偶數;若5的后面還有不為“0”的任何數,則此時無論5的前面是奇數還是偶數,均應進位。

例如:
9.8249=9.82, 9.82671=9.83
9.8350=9.84, 9.8351 =9.84
9.8250=9.82, 9.82501=9.83

量器的使用
1.量器主要有:帶刻度燒杯、帶刻度試管、帶刻度吸管、量杯、量筒、容量瓶、移液管、移液槍、微量進樣器。
2.前面四個都是比較粗略的量器,基本上只作一個估計值。對于一些不需精確濃度的試劑的配制是可行的。
3.量筒有大少不同的規格。
4.容量瓶比較精確。但不能配成隨意的容量。
5.注意:玻璃量器均不能高溫,以免容量不準。只能吹干。

容量瓶的使用六忌
一忌用容量瓶進行溶解(體積不準確)。
二忌直接往容量瓶倒液(灑到外面)。
三忌加水超過刻度線(濃度偏低)。
四忌讀數仰視或俯視(仰視濃度偏低,俯視濃度偏高)。
五忌不洗滌玻璃棒和燒杯(濃度偏低)。
六忌標準液存放于容量瓶(容量瓶是量器,不是容器)。

pH計的使用
1.有些對pH要求比較精確的溶液是用要pH計來測定的。
2.pH計的校準,標準液體的有效期。
3.按照SOP去操作。
4.要注意保護好電極。不用時多以氯化鉀飽和溶液來保護電極。

配制好的試劑的使用和保存
一是配制試劑的容器的選擇。
二是標簽。
三是濃度的準確性。
四是有關特殊要求。有的試劑配制前要加溫。

注意事項:
一是配好后盡快使用。
二是要注意反復取用試劑時,不要污染。以移液槍取液時,注意更換槍頭。多余的液體不要返回瓶內,而應放掉。
三是在同一次配制中不要用不同批次的試劑。
四是試劑用完后,相關器具要洗滌。

常見問題及解決方式
1.物理性質的變化。
2.最常見的有:產生沉淀或結晶、產生絮狀物、顏色變化、黏度變化、產生霉菌、產生氣味。
3.化學性質的變化。
如: PH的變化、失去氧化性、失去還原性。
4.生物學性質的變化。
如:酶失活、生物分子降解等。
5.一般而言,除少數不影響使用的現象外,試劑都得重配。

其它
1.購買試劑時試劑是否含結晶水。
2.有些試劑溶解度特別大,常規放置,即使是密封也很容易吸潮。
3.因太少的量稱量難以準確。因此,原則是:采用濃配一一稀釋法。

太少量難以準確稱量
先稱取電子秤能稱量準確的量,比如:10mg。配成10mL。這樣濃度就是1mg/mL。將這個濃度的溶液稀釋。
當然,稱多少以及配成多少毫升決定于要最終配成的濃度。
總之,原則要有足夠能稱量準確的量。有時候,可能要多步稀釋才能達到目的。
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