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簡述凝膠層析技術的原理和過程

2024-04-19 9:53 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
凝膠層析的固定相是凝膠。凝膠是一種不帶電荷的具有三維空間多孔網狀結構的物質,凝膠的每個顆粒內部都具有很多細微的小孔,如同篩子一樣。
凝膠層析(又叫凝膠過濾或分子篩)凝膠層析是指混和物隨流動相流經固定相的層析柱時,混合物中各組分按其分子大小不同而被分類的技術。
 
1.  原理

凝膠層析的固定相是凝膠。凝膠是一種不帶電荷的具有三維空間多孔網狀結構的物質,凝膠的每個顆粒內部都具有很多細微的小孔,如同篩子一樣。

常用凝膠有瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠、葡聚糖凝膠等。

葡聚糖凝膠介質是由多聚葡聚糖與環氧綠丙烷交連而成。zui常用的葡聚糖凝膠層析介質是Sephadex G系列,不同型號的凝膠用G表示,G代表交聯度,從G10到G100。“G”后面的數字表示每10g干膠的吸水量,可根據待分離混和物分子量大小選用不同“G”值的凝膠。

2.  分離過程:

樣品隨洗脫液的流動下移

3.  影響凝膠柱層析的主要因素

(1)層析柱的選擇與裝填層析柱的大小應根據分離樣品量的多少及對分辨率的要求而定。凝膠柱填裝后用肉眼觀察應均勻、無紋路、無汽泡。

(2)流動相――洗脫液的選擇:是含有一定濃度鹽的緩沖液,目的是為了防止凝膠可能有吸附作用。其選擇主要取決于待分離樣品,一般來說只要能溶解洗脫物質,并不使其變性的緩沖液都可用于凝膠層析。

(3)加樣量:加樣量的多少應根據具體的實驗而定:一般分級分離時加樣量約為凝膠柱床體積的1%-5%,而分組分離時加樣量約為凝膠柱床體積的10%-25%.

(4)凝膠再生:葡聚糖凝膠再生使用NaOH(0.2M)和NaCl(0.5M)混合液處理。

我司供應各種凝膠系列產品
產品編號 產品名稱
SY2141    葡聚糖凝膠LH-20
SY2142    葡聚糖凝膠LH-60
SY2143    葡聚糖凝膠G-10
SY2144    葡聚糖凝膠G-15
SY2145    葡聚糖凝膠G-25
SY2146    葡聚糖凝膠G-50
SY2147    葡聚糖凝膠G-75
SY2148    葡聚糖凝膠G-100
SY2149    葡聚糖凝膠G-150
SY2149    葡聚糖凝膠G-150
SY2150    葡聚糖凝膠G-200
SY2250    瓊脂糖凝膠2B
SY2251    瓊脂糖凝膠4B
SY2252    瓊脂糖凝膠6B
SY2253    瓊脂糖凝膠CL-2B
SY2254    瓊脂糖凝膠CL-4B
SY2255    瓊脂糖凝膠CL-6B  
SY2256    瓊脂糖凝膠4FF
SY2257    瓊脂糖凝膠6FF
SY2258    丙烯葡聚糖凝膠S-100
SY2259    丙烯葡聚糖凝膠S-200
SY2260    丙烯葡聚糖凝膠S-300
SY2261    丙烯葡聚糖凝膠S-400
SY2262    丙烯葡聚糖凝膠S-500
SY2263    鎳-NTA瓊脂糖凝膠6FF
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SY2265    藍色-瓊脂糖凝膠CL-6B
SY2266    紅色-瓊脂糖凝膠6FF
SY2267    DEAE-葡聚糖凝膠A-25
SY2268    DEAE-葡聚糖凝膠A-50
SY2269    QAE-葡聚糖凝膠A-25
SY2270    QAE-葡聚糖凝膠A-50
SY2271    CM葡聚糖凝膠C-25
SY2272    CM葡聚糖凝膠C-50
SY2273    SP-葡聚糖凝膠C-25
SY2274    SP-葡聚糖凝膠C-50
SY2275    DEAE-瓊脂糖凝膠FF
SY2276    CM-瓊脂糖凝膠FF
SY2277    DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B
SY2278    CM-瓊脂糖凝膠CL-6B
SY2350    Q-瓊脂糖凝膠HP
SY2351    SP-瓊脂糖凝膠HP
SY2352    Q-瓊脂糖凝膠FF
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SY2354    DEAE-瓊脂糖凝膠FF
SY2356    DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B
SY2450    苯基-瓊脂糖凝膠6FF
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SY2452    苯基-瓊脂糖凝膠CL-4B
SY2453    丁基-瓊脂糖凝膠4FF
SY2454    丁基-瓊脂糖凝膠H.P.
SY2455    丁基-瓊脂糖凝膠4B
SY2456    辛基-瓊脂糖凝膠4FF
SY2457    辛基-瓊脂糖凝膠H.P.
SY2458    辛基-瓊脂糖凝膠CL-4B
SY2550    鎳-瓊脂糖凝膠6FF
SY2551    鎳-瓊脂糖凝膠H.P.
SY2552    藍色-瓊脂糖凝膠6FF
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SY2554    紅色-瓊脂糖凝膠6FF
SY2555    肝素-瓊脂糖凝膠6FF
SY2556    肝素-瓊脂糖凝膠H.P.
SY2557    谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠4B
SY2558    谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠4FF
SY2559    谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠H.P.
SY2560    胰蛋白酶-瓊脂糖凝膠4B
SY2561    苯甲脒-瓊脂糖凝膠6B
SY2562    苯甲脒-瓊脂糖凝膠4FF
SY2563    ConA-瓊脂糖凝膠4B
SY2564    賴氨酸-瓊脂糖凝膠4B
SY2565    羧基-瓊脂糖凝膠4B
SY2566    明膠-瓊脂糖凝膠4FF
SY2567    環氧活化-瓊脂糖凝膠6B
SY2568    精氨酸-瓊脂糖凝膠4B
SY2650    DEAE 纖維素DE-32
SY2651    DEAE 纖維素DE-52
SY2652    羧甲基纖維素CM-52
SY2664    羧甲基纖維素CM-32
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