半固體培養基，如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中，就制成了半固體培養基。以瓊脂為例，它的用量在0.2~0.7%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力，有時用來保藏菌種。

固體培養基是在培養液中加了瓊脂（瓊脂，一種凝固劑，在44度以下都呈凝固狀）。這種培養基常用于鑒定菌種和計數。

半固體培養基是在培養液中加入少量的凝固劑（如0.2%～0.5%的瓊脂）。這種培養基常用于觀察細菌的運動、厭氧菌的分離和菌種鑒定等。
 
三種半固體培養基配方介紹

牛肉膏蛋白胨半固體瓊脂

(用于培養細菌,腸道致病菌檢驗)

成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化鈉5g、瓊脂3~5g,蒸餾水1000mL,pH7.4±0.2。

制法:將各成分溶解于蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解，于20 -25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計校正pH 7.4±0.2,分裝小試管中，分裝至試管高度1/4左右為宜,于0.1MPa滅菌15~20min,直立凝固備用。

醋酸鉛半固體培養基

(用于硫化氫試驗)

成分:pH7.4的牛肉膏蛋白胨半固體瓊脂100mL,硫代硫酸鈉0.25g,10%醋酸鉛水溶液lmL。

制法:將牛肉膏蛋白胨半固體瓊脂培養基100mL加熱溶化，待冷至60℃時加人硫代硫酸鈉0.25g,調pH7.2,分裝于三角瓶中,0.07MPa滅菌20min后，待冷至55~60°C,加入1mL無菌的10%醋酸鉛水溶液，混勻后，倒入滅菌試管中。

硫酸亞鐵半固體培養基

(用于硫化氫試驗)

成分:牛肉膏3g、酵母浸膏3g、蛋白胨10g、硫酸亞鐵0. 2g、硫代硫酸鈉0.3g、氯化鈉5g、瓊脂12g,蒸餾水1000mL, pH7.4。

制法:將各成分加熱溶解，校正pH,分裝試管,0.07MPa高壓滅菌20min,取出直立,待其凝固。