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PCR非特異性擴增的原因及處理辦法

2024-11-01 10:13 作者：洛辰 來源：上海遠慕生物試劑
原因：

1、引物特異性差

2、模板或引物濃度過高

3、酶量過多

4、Mg2+濃度偏高

5、退火溫度偏低

6、循環次數過多

對策：

1、重新設計引物或者使用巢式PCR

2、適當降低模板或引物濃度

3、適當減少酶量

4、降低鎂離子濃度

5、適當提高退火溫度或使用二階段溫度法

6、減少循環次數
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