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流式細胞儀分選后,如何保存和處理細胞樣本?

2025-04-17 9:44 來源:上海遠慕生物試劑
在保存和處理分選后的細胞時,要始終注意無菌操作,避免細胞污染,同時根據具體的實驗需求和細胞特性選擇合適的方法。

  細胞樣本在流式細胞儀分選后,保存和處理方法如下:

  保存方法:

  短期保存(數小時至數天):

  置于4℃冰箱:在含有適當培養基和血清的條件下,可保存較短時間,但細胞活性可能會逐漸下降。

  可添加細胞保護劑,如DMSO(二甲基亞砜),但需注意其濃度和對細胞的影響。

  長期保存(數周、數月甚至數年):

  液氮凍存:將細胞懸浮在含有冷凍保護劑(如10%DMSO和90%胎牛血清)的培養基中,逐步降溫至-80℃,然后轉移至液氮中保存。

  處理方法:

  繼續培養:

  如果細胞活性良好,可將分選后的細胞接種到新的培養皿或培養瓶中,在合適的培養條件下繼續培養。

  定期觀察細胞狀態,監測細胞生長和增殖情況。

  實驗分析:

  提取DNA、RNA或蛋白質進行分子生物學分析,如PCR、測序、Western blot等。

  進行細胞功能實驗,如增殖實驗、遷移實驗、凋亡檢測等。

  細胞固定:

  若要進行免疫熒光染色等形態學觀察,可以使用多聚甲醛等固定劑對細胞進行固定。

  在保存和處理分選后的細胞時,要始終注意無菌操作,避免細胞污染,同時根據具體的實驗需求和細胞特性選擇合適的方法。

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