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組蛋白去乙酰化酶1抗體修復方法

2017-12-04 16:26 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
組蛋白去乙酰化酶1抗體修復方法由上海遠慕生物詳細介紹!
中文名:組蛋白去乙酰化酶1抗體
英文名稱:Anti-HDAC1
供應商:上海遠慕
規格:0.1ml/0.2ml
產品類型:一抗
濃度:1mg/1ml
克隆類型:polyclonal or monoclonal

抗體來源:Rabbit or Mouse or Goat 
抗體修復方式:
修復液:0.01M 枸櫞酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
相關標記:Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
產品應用:可以用于做石蠟切片免疫組化,冰凍切片免疫組化,Elisa,WB,免疫熒光、流式細胞術等實驗。
組蛋白去乙酰化酶1抗體修復方法

組蛋白去乙酰化酶1抗體操作方法
1.將帶有Flag標簽的HDAC1表達質粒分別轉染食管癌細胞EC109和結腸癌細胞HCT116,采用免疫印跡檢測外源基因的表達。
2.然后采用Flag抗體進行親和沉淀,收集蛋白樣品進行質譜測定。結果:采用RT-PCR技術成功地構建了含Flag標簽的HDAC1。
3.轉染后檢測顯示該表達質粒可高效表達于EC109和HCT116細胞中。
4.親和沉淀所獲得的蛋白樣品經質譜檢測后,分別從EC109細胞和HCT116細胞中篩選出107和17個可能與HDAC1相互作用的蛋白質。
結論:通過質譜篩選出可能與HDAC1相互作用的蛋白,為進一步研究HDAC1基因功能及其在腫瘤中的生物學意義奠定基礎。


組蛋白去乙酰化酶1抗體修復方法
1,沸水浴修復,將盛有修復液和玻片的燒杯置于沸水浴環境,保持外部沸騰狀態15min,自然冷卻至室溫。
2,微波修復,將盛有修復液和玻片的燒杯置于微波爐中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷卻至室溫。
3,高壓修復,修復液加入高壓鍋加熱至沸騰,放入玻片,封蓋加壓持續加熱至噴氣時開始計時修復2min,自然冷卻至室溫。
4,使用胃蛋白酶修復,將胃蛋白酶修復液加入到組織上,37℃,消化30min。


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