時間沒有等我，是你忘了帶我走 ，我左手過目不忘的的螢火，右手里是十年一個漫長的打坐。轉眼間暑假已經開始了， 免疫組化問題，上海遠慕一一為您解答

1、染色過強

原因及相關解決方法

a 抗體濃度過高或孵育時間過長 降低抗體滴度、抗體孵育時間：室溫1小時或4度過夜

b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28度

c DAB顯色時間過長或濃度過高 顯色時間不超過5-12分鐘，以顯微鏡下觀察為準 

2、非特異性背景染色

原因及相關解決方法

a 操作過程中沖洗不充分： 每步沖洗3次每次5分鐘

b 組織中含過氧化物酶未阻斷 ：可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長

c 組織中含內原性生物素：正常非免疫動物血清再封閉

d 血清蛋白封閉不充分：延長血清蛋白封閉時間

3、染色弱

原因及相關解決方法 

a 抗體濃度過低、孵育時間過短：提高抗體濃度、孵育時間不能少 于60分鐘

b 試劑超過有效使用時間： 應更換試劑

c 操作中添加試劑時緩沖液未瀝干 ：每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液

使試劑稀釋 （應防止切片干燥）

d 室溫太低 ：低于15度要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜

e 蛋白封閉過度：封閉不要超過12分鐘

4、染色陰性

原因及相關解決方法 

a 操作步驟錯誤：應重試設陽性對照

b 組織中無抗原：設陽性對照以驗證試驗結果

c 一抗與二抗種屬連接錯誤：仔細確定一抗二抗種屬無誤

  上海遠慕是一家專業從事“產品研發生產、市場銷售、技術服務”為一體的高科技生物技術公司，公司生產的產品質量有保證，含量高，能夠給實驗帶來準確的結果。如有需要可咨詢我司銷售人員，我們將竭誠為您服務。