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胎牛血清培養中怎么防止黑點生成

2019-12-02 11:55 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
   近期有客戶咨詢胎牛血清細胞培養中黑點如何防止生成?對此我司技術專員給出了詳細了解釋,為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。因此定要做好以下幾點。方可使細胞培養順利。
    (1) 盡可能地減少血清凍融次數。
    (2) 培養基無需37℃水浴。
    (3) 培養基保持zuiPH 值7.0-7.2。
    (4) 嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。
    (5) 掌握細胞傳代的zui時機,細胞切勿生長過老。
    一、化凍 
    將血清從-20 度冰箱中取出,室溫(或浸于自來水中)化凍(約需要30分鐘至2小時,也可放于4度冰箱化凍過夜;化凍后若不馬上滅活,可以放入4度冰箱中暫時保存)
    二、滅活
    (1)放入室溫的水浴鍋內開始加熱(同時放入一個空的血清瓶,內裝100ml自來水,插入一根溫度計,溫度監控以此為準)
    (2)當溫度計顯示56度時,停止加熱,改為間斷加熱,維持56度(±0.5度)30分鐘(±3分鐘;若不小心使溫度上升超過56度,則:若仍未超過60度,且時間很短,比如不超過5分鐘,則仍可使用;若超過60度,或者時間較長,則棄去不用,或者嘗試用于一些普通細胞的培養)
    (3)取出,自然冷卻至室溫(約需1-3小時),可分裝或-20度繼續凍存。

    三、分裝
    (1)轉入無菌間,在超凈臺內將血清分裝入10ml離心管中(注意預先要將血清輕輕搖動數周、混勻;用吸液管或吹大管吹出血清時要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產生氣泡;如果產生氣泡, 則在酒精燈火焰上過一下)
    (2)放入-20 度冰箱凍存。
    (3)全部操作約需要4-6小時。

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