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CPD抗凝劑實驗操作步驟

2020-05-20 9:30 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:CPD抗凝劑
供應商:遠慕生物
產品規格:100ml
用途:血液保存液,1.5mlCPD抗凝劑+10ml血,2-6℃保存21天。
注意事項:主要由檸檬酸鈉、檸檬酸、葡萄糖、磷酸鹽等組成。
儲存條件:4℃,6個月。
檢測方法: 檢測方法多,檢測原理清晰,主要包括比色法、微板法、速率法、苯胺法、紫外分光法、雙縮脲法、凝固法等;
操作:便捷、靈敏;
應用:適用范圍廣泛,研究領域寬,滿足科研人員的各方面需求;
產品參數:分子生物學產品參數靈活,有不同的濃度可以滿足不同的實驗,還可以為客戶定制不同規格,不同參數的產品;
規格:產品規格從1Ml到500ml,種類很多,根據客戶需求選擇不同規格;
產品特性:大部分產品經過不同滅菌方式處理,使用更安全;

Anticoagulant CPD Solution(抗凝劑CPD)
1、組成成分:
A、1×TE緩沖液:10 mmol/L Tris.Cl;1mmol/L EDTA,pH 8.0。
B、1×TAE緩沖液:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA,pH 8.0。
C、1×TBE緩沖液:45 mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA,pH 8.0。
2、用途:
A、TE緩沖液:一般用作溶解劑或保持劑,常用于溶解DNA,能穩定儲存DNA。
B、TAE緩沖液:生物學中使用最廣泛的核酸電泳緩沖液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。
C、TBE緩沖液:生物學中常用的核酸電泳緩沖液,主要用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳。
3、TAE和TBE緩沖液的選擇:
TAE和TBE緩沖液都可以用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳,兩者各有利弊,應根據實際情況選擇不同的緩沖液。



TAE和TBE緩沖液的比較
TAE緩沖液:
成分:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA
優點:超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子 緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用。質量電泳大于 13kb 的片段時分離效果好,可用于回收 DNA 片段。
缺點:緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用。
TBE緩沖液:
成分:45mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA
優點:緩沖能力強,適合較長時間電泳,分辨率較高,電泳小于 1kb 的片段時分離效果好。
缺點:緩沖液中的硼酸成分會影響 DNA 回收效率以及后續的酶反應實驗。
4、Anticoagulant CPD Solution(抗凝劑CPD)注意:
TBE濃溶液長時間存放后會形成沉淀物,出現沉淀后應予以廢棄。



TMB的用途:
一種新型安全的色原試劑;TMB已在逐步取代強致癌物聯苯胺和其他致癌性的聯苯胺衍生物,應用于臨床化驗、法醫檢驗、刑事偵破及環境監測等領域;尤其是在臨床生化檢驗方面,TMB作為過氧化酶的新底物,在酶免疫分析法(EIA)和酶聯免疫吸附檢驗法(ELISA)中獲得了廣泛的應用;主要應用于如下項目:潛血指紋檢測;唾液中酒精的快速檢測;尿聯試紙的配制;肝炎病毒檢測;妊娠檢測試驗;血液和尿液中葡萄糖、血紅蛋白、白蛋白的快速測定;糞便隱血試驗;血液中粒細胞值的測定、類固醇、性激素的檢測;酶活性的測定;抗原、抗體及遺傳物質的分析、檢測;生物樣品的染色;水質檢測(余氯、亞硝酸鹽等)。



TMB的作用:
TMB即四甲基聯苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應,且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的發色團。同時反應產物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應進行。
TMB的反應產物為深藍色,Anticoagulant CPD Solution(抗凝劑CPD)利于光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的范圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。由于上述優點,TMB是一種較強的皮膚刺激劑,并有致癌的潛在可能,故使用時應帶手套及在通風條件下操作。TMB經HRP作用后共產物顯藍色,目視對比鮮明。TMB性質較穩定,可配成溶液試劑,只需與H2O2溶液混和即成應用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有無致癌性等優點,因此在ELISA中應用日趨廣泛。酶反應用HCL或H2SO4終止后,TMB產物由藍色呈黃色,可在比色計中定量,最適吸收波長為450nm。故TMB顯色的試劑盒常用450nm/630nm檢測。ABTS雖不如OPD和TMB敏感,但空白值極低,也為一些試劑盒所采用。

 
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