酵母細胞的培養專題
本文主要介紹了四種酵母培養基的配制方法與原理，主要包括麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的制備原理和方法。具體如下：

一、目的要求

了解合成培養基、半合成培養基和天然培養基的配制原理。

學習和掌握麥芽汁培養基、馬鈴薯葡萄糖培養基、豆芽汁葡萄糖培養基和察氏培養基的配制方法。

二、基本原理

麥芽汁培養基和馬鈴薯葡萄糖培養基被廣泛用于培養酵母菌 和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養基有時也可用于培養放線菌。豆芽汁葡萄糖培養基也是培養酵母菌及霉菌的一種優良培養基。察氏培養基主要用于培養霉菌觀察形態用。麥芽汁培養基為天然培養基，馬鈴薯葡萄糖培養基和豆芽汁葡萄糖培養基二者均為半合成培養基，而察氏培養基則為合成培養基。培養基配方中出現的自然pH系指培養基不經酸、堿調節而自然呈現的pH。

三、實驗材料

(一) 藥品

葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O，FeS04、瓊脂 。

(二) 儀器

天平、高壓蒸汽滅菌鍋。

(三) 玻璃器皿

移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養皿、玻璃漏斗等。

(四) 其他物品

藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。

四、實驗內容

(一) 麥芽汁培養基的配制

1.培養基成分

新鮮麥芽汁一般為10-15波林。

2.配制方法

(1) 用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長至麥粒的兩倍時，讓其停止發芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存備用。

(2) 取一份麥芽粉加四份水，在65℃水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如無藍色出現，即表示糖化完全)。

(3) 糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清，加水20 ml，調勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過濾)。

(4) 用波美比重計檢測糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調pH至6.4。如當地有啤酒廠，可用未經發酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到 10-15波林后使用。

(5) 如配固體麥芽汁培養基時，加入2%瓊脂 ，加熱融化，補充失水。

(6) 分裝、加塞、包扎。

(7) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

(二) 馬鈴薯葡萄糖培養基的配制

1.培養基成分

馬鈴薯 20g

葡萄糖 2 g

瓊脂 1.5-2g

水 100ml

自然pH

2.配制方法

(1) 配制20%馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml。80℃浸泡lh，用紗布過濾，然后補足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20%馬鈴薯浸汁，貯存備用。

(2) 配制時，按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂 ，繼續加熱融化并補足失水。

(3) 分裝、加塞、包扎。

(4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

(三)豆芽汁葡萄糟培養基的配制

1.培養基成分

黃豆芽 10g

葡萄糖 5g

瓊脂 1.5-2g

水 100ml

自然pH

2.配制方法

(1) 稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100 ml水，小火煮沸30 min，用紗布過濾，補足失水，即制成10%豆芽汁。

(2) 配制時，按每100 ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g瓊脂，繼續加熱融化，補足失水。

(3) 分裝、加塞、包扎。

(4) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

(四)察氏(czapck)培養基的配制

1.培養基成分

蔗糖 3g

NaN03 0.3g

K2HP04 0.1g

KCl 0.05g

MgSO4·7H2O 0.05 g

FeS04 0.001 g

瓊脂 1.5-2g

蒸餾水 100ml

自然pH

2.配制方法

(1) 稱量及溶化 量取所需水量約2/3左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。

(2) 定容 候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。

(3) 加瓊脂 加入所需量瓊脂，加熱融化，補足失水。

(4) 分裝、加塞、包扎。

(5) 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。

注意事項：這四種培養基的配制無需用酸或者堿調節pH，滅菌20分鐘足夠了，時間過長容易把培養基成分破壞掉，太短了容易造成污染。