可以說，到目前為止，針對體外細胞培養的支原體檢測的方法還沒有一種單獨使用就可以保證100%正確，既不會漏檢（假陰性），也不會多檢（假陽性）。

（1）支原體固體培養法。通過固體培養法無法檢測污染細胞的一種最常見的支原體，即豬鼻支原體（M.Hyorhinis）。這是因為豬鼻支原體無法在支原體固體培養基上形成可見的菌落，而豬鼻支原體約占所有支原體污染的20-50%。這就意味支原體固體培養法漏檢率高達20-50%。

（2）PCR法。PCR法導致的假陽性大家比較熟悉，無需多說。值得注意的是，由于細胞培養液中，經常會含有強烈抑制PCR擴增的代謝產物，如果不進行樣品的前處理而直接使用細胞培養原液進行PCR檢測，產生假陰性的概率是非常大的。

（3）熒光染色法。由于該方法本身的靈敏度較低，輕度的支原體污染往往無法檢測出來。該方法漏檢率也不會低。

（4）檢測支原體特異性酶的方法，比如Lonza公司的MycoAlert Plus Mycoplas Detection Kit和上海遠慕生產的《發光法支原體檢測試劑盒》。主要缺點是發光值有一定的波動，處于檢測下限邊緣的讀值可能會造成誤判。

（5）《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》該方法盡管有許多優點，但是目前為止，我們只能保證該試劑盒能檢測出說明書上列舉的13種支原體，雖然這13種支原體大約占了所有污染細胞的支原體種類的99%左右，但是該方法也不能保證100%的支原體檢出率。

綜上所述，單獨使用目前市面上的任何一種支原體檢測試劑盒，都無法做到100%正確，既不會漏檢（假陰性），也不會多檢（假陽性）。嚴格的支原體檢測，至少需要使用兩種，最好使用三種不同原理的支原體檢測方法同時進行檢測，才能使檢測結果接近100%正確。

如果您想得到100%正確的支原體檢測結果（比如，開展細胞治療的客戶，進行干細胞培養的客戶，生產血清、胰酶、培養液的客戶，出售各種原代培養細胞系和腫瘤細胞系的客戶等），任選本公司生產的《一步法恒溫支原體檢測試劑盒》、《PCR法支原體檢測試劑盒》、《發光法支原體檢測試劑盒》和《探針法支原體檢測試劑盒》中的兩種進行檢測，將會得到比較滿意的結果。如果幾種不同支原體檢測方法的檢測結果一致，正確率幾乎就是100%