細胞培養是大多數生物實驗室都會遇到的基礎實驗，但不是最簡單的實驗。細胞培養蘊含著大學問。細胞培養狀態不好相信每個細胞培養者都遇到過。有時候細胞狀態不好，轉染 、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多，但首要因素是選好合適的細胞培養基。很多研究者只對一兩種培養基比較了解，下面讓我們詳細介紹一下各種培養基的不同之處。

培養基

基礎培養基絕大多數是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。最廣泛應用的基礎培養基是MEM ，其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。

目前科研市場經典的培養基有很多種，其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應用最廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。

◆ MEM是由基礎培養基(BME)發展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度。

◆ 改良的基礎培養基培養基也就是我們所說的DMEM培養基最初是為小鼠成纖維細胞培養專門設計的，現在常用于貼壁細胞的培養。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。

◆ a-MEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養成分要求苛刻的細胞。

◆ Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM 等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物，這種培養基已應用于許多原代培養及更難養的細胞系的培養。

◆ RPMI 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的，現在已廣泛應用于懸浮細胞的培養。

很多新人經常困惑細胞該用哪一種培養基呢?其實這個問題的答案可以很簡單，也可以好復雜。如果這種細胞是購自細胞庫，那您直接問供應商就行了，他們會給您一個最適合的推薦。如您不知道細胞的來源，您也可以找到相關的文獻，基本文獻中使用的培養基都可作為參考。但如果你是著手建立一種全新細胞的培養體系，根本找不到任何參考，那你就得花點時間自己試驗。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，首選MEM做貼壁細胞培養、RPMI 1640做懸浮細胞培養會是一個好的開始。最好同時選購幾種不同的培養基同時進行培養實驗來選擇其中最適合的。有時候你會驚訝地發現你的最佳培養條件與文獻報道的不同，就算是同一種培養條件，細胞的生長狀態也時好時壞，這是很正常的。因為試劑、水、不同批號的血清之間都存在著差異。要提高培養基的穩定性，可以從培養基和血清兩方面入手。

以前大部分實驗室都是用干粉培養基，但干粉有很多弊端

1. 配制過程就較為繁瑣，要溶解、調pH值，過濾，過程中可能會產生一些濃度誤差，

2.有些實驗室的水質并不理想，所以培養的效果會有差異。

如果使用液體培養基，這種人為的誤差會減少，因為畢竟是大批量工業化生產的，批間差會很小。

血清

說到細胞培養，血清固然是細胞培養中不可或缺的成分，但血清的批間差異大，更換血清時需要做大量的測試以取保替換的血清與原來的相似。而血清的供應也是必須要考慮的因素。由于氣候或瘋牛病等的影響，血清貨源的問題對實驗的影響可非同小可。另外，血清的價格也很昂貴，高品質的澳洲血清價格更高。因此，也有一些實驗室開始換用無血清培養基。

無血清培養基(Serum-Free Media)，

通常以SFM表示，顧名思義，就是在細胞培養中不需要添加血清，但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等，能減少上述血清帶來的不利因素，使細胞培養的條件更穩定。但它也不是完美的，從有血清培養過渡到無血清培養的條件并不像想象中那么直截了當。處于發育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外，它的價格也比普通的培養基貴很多。

細胞培養基應用選擇

選擇培養基沒有固定的標準，有幾點建議可供您參考：

（1） 建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首選的培養基?？梢圆殚唴⒖嘉墨I，或在購買細胞株時咨詢。

（2） 其它實驗室慣用的培養基不妨一試，許多培養基可以適合多種細胞。

（3） 根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株多選 RPMI1640。

（4） 用多種培養基培養目的細胞，觀察其生長狀態，可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷，根據實驗結果選擇最佳培養基，這是最客觀的方法，但比較繁瑣。