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牛血清儲存、分裝、解凍要點

2020-12-09 10:22 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
細胞培養的一個重要環節是選擇成分適合又營養豐富的細胞培養基。這其中以經典培養基添加5~10%的牛血清最為常用,它能維持細胞活力,促進細胞增殖。

牛血清在細胞培養中提供細胞生長和增殖所需的生長因子、激素、蛋白、粘附和鋪展因子和其他多種營養物質。


下面列出牛血清儲存、分裝、解凍要點,以供初次接觸細胞培養的新手或實驗人員參考,以促進試劑的合理應用和細胞的順利培養。

一、儲存

要保證牛血清質量,牛血清必須貯于-20℃。不能長期存放于4℃和室溫,否則影響血清品質。同時避免血清的反復凍融。

二、分裝

如果1次無法用完1瓶血清,可將血清40~45mL分裝于無菌的50mL離心管中,每次依用量取出。由于血清結凍時體積會增加約10% ,裝管時必須預留此膨脹體積之空問,否則易發生血清擠出容器發生污染,或容器凍裂。

三、解凍

要解凍使用血清時,應使用逐步解凍法,才不會使血清質量受損。具體解凍方法見下表,該方法系締一生物與國際專家總結而成,可最大限度地保留因子活性,非常重要。

不同容積血清(100ml,500ml,1L)使用不同的融化方案,全程只需要大約2.5個小時。

需要嚴格按照三步法操作。如無法保證20℃水浴,也可用接近此溫度的自來水。

在融化過程中要慢慢搖動,使血清混勻,但不要產生泡沫!

在解凍過程中必須注意的是,水浴時血清的平面要完全浸在水中。要一直規則均勻搖晃(小心勿造成氣泡,不要產生泡沫,否則有損質量),使溫度與成分始終均一。勿直接由-20℃放至37℃快速解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生大量沉淀。

一般不需要對胎牛血清進行熱滅活。因胎牛血清中補體系統尚不完全,影響極小。熱滅活反而非常造成沉淀和導致部分因子失活。

以上意見希望能對你的實驗帶來幫助。
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