一、不同廠家胎牛血清的批號篩選

1．動物細胞培養(yǎng)用血清的基本要求

用于動物細胞培養(yǎng)的血清，應富含細胞活性物質(zhì)，尤其有豐富細胞生長因子、維生素、氨基酸等成分，但不能有微生物污染，尤其不能有細胞型微生物。首-選的培養(yǎng)用血清是胎牛血清，其次可以經(jīng)特定篩選后選擇使用某些品牌的新生牛血清或小牛血清。在配液標識的書寫上，一般用FCS表示胎牛血清，用BS表示牛血清。

由于在血清超濾除菌時，沒有細胞壁的原核微生物支原體可能容易通過0.22μm的細菌濾器，甚至通過0．lμm的細菌濾器。

考慮到上述因素，使得不同廠家的血清，在細胞生長因子種類與濃度等方面存在不同，殘留微生物的風險也不同，即便相同廠家的血清也可能存在批間差異。

2．血清篩選方法

普通的血清質(zhì)量篩選方法是利用特定細胞株的克隆化培養(yǎng)進行。選擇克隆形成率高的血清批號進行購買。

可以比較出不同廠家的血清或相同廠家的不同批號的血清質(zhì)量差異，購買時盡量選擇細胞生長快、克隆形成時間短、無細胞畸形、無微生物污染特別是支原體污染的批號。

3．進口血清的篩選原則

盡量選擇供貨量大，使用用戶廣泛的、信譽良好的品牌產(chǎn)品，如Gibco品牌、ATCC品牌。批量購買前，應做克隆化細胞培養(yǎng)，判斷該批號血清的質(zhì)量水平。

購買時，最-好直接向一級代理商訂購。如果經(jīng)手二級、三級代理商訂購，很可能由于運輸、保存等環(huán)節(jié)的增加而引入不可預知的風險。如反復凍融多次的血清，其中的細胞生長因子等細胞活性物質(zhì)將明顯縮減，不利于動物細胞培養(yǎng)。

4．國產(chǎn)血清的篩選原則

盡量選擇供貨量大，供貨歷史比較長，信譽良好，使用用戶比較廣泛的那些廠家進行血清購買前的篩選。

批量購買前，務必核實可購買的批號和供貨量，并及時做克隆化細胞培養(yǎng)，判斷該批號血清的質(zhì)量水平。

購買時，盡量購買一個批號的血清。最-好直接向一級代理商訂購，如果經(jīng)手二級、三級代理商訂殉，很可能由于運輸、保存等環(huán)節(jié)的增加，或經(jīng)手人的細胞培養(yǎng)技術(shù)背景薄弱等因素，從而引入不可預知的風險，導致不必要的經(jīng)濟損失，影響實驗進程和生產(chǎn)進度。如果不得不向二級、三級經(jīng)銷商購買，務必詳細寫明訂單要求，注明必要的注意事項。

二、血清的滅活

關(guān)于未滅活血清與滅活血清的判識，可以通過仔細閱讀所購血清的說明書，或直接聯(lián)系信譽好的供貨商，便可以清楚是否已經(jīng)滅活。

已經(jīng)滅活的血清在使用前無需滅活處理，否則，需要用戶自行按血清滅活方法進行滅活處理方可用于動物細胞培養(yǎng)。

血清滅活的主要理由是使血清中含有的補體滅活，以免用于動物細胞培養(yǎng)時發(fā)生補體攻擊細胞膜，導致所培養(yǎng)的細胞壞死。滅活條件下，也能滅活血清中可能存在的支原體。

三、滅活血清的無菌分裝與保存

滅活后的血清應及時按預計的每次使用量進行無菌分裝，減少血清凍融的次數(shù)，以免血清中的細胞活性物質(zhì)受破壞。分裝后，加寫標識，平衡到室溫后轉(zhuǎn)入-20℃冰箱存放。