一、目的要求

了解某一抗生素的抗菌范圍；學習抗菌譜試驗的基本方法。

二、基本原理

許多微生物在其生命活動過程中能產生某種特殊的代謝產物，具有選擇性地抑制或殺死其他微生物的作用，例如抗生素。不同抗生素的抗菌譜是不同的，某些抗生素只對少數細菌有抗菌作用，例如青霉素一般只對革蘭氏陽性菌有抗菌作用，多粘菌素只對革蘭氏陰性菌有作用，這類抗生素稱為窄譜抗生素；而另一些抗生素則對多種細菌有作用，例如四環素、土霉素對許多革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌都有作用，這類抗生素稱為廣譜抗生素。

如果將產生某種抗生素的菌劃直線接種在豆芽汁葡萄糖瓊脂培養基平板上，經培養后，就會長出一條菌帶，并產生某種抗生素向菌帶周圍擴散。再與這條菌帶相垂直劃直線接種某些不同的試驗菌，就會產生不同長度的抑菌帶，如圖Ⅸ-3。根據抑菌帶的長短，即可判斷該抗生素對不同微生物的影響。本實驗說明產黃青霉產生的青霉素對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的抑制效果。

三、器材

產黃青霉（Peenicillium chrysogenum）、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌，枯草芽孢桿菌；

豆芽汁葡萄糖瓊脂培養基，無菌平皿，接種環等。

四、操作步驟

1．將豆芽汁葡萄糖瓊脂培養基溶化后，冷至45℃左右倒平板，凝固待用。

2．用接種環挑取產黃青霉的孢子在平板上按圖Ⅸ-3，1所示劃一直線。

3．接種后，倒置于28℃溫室中培養2—3天。

4．待上述平板形成菌苔后，再用接種環從產黃青霉菌的菌帶邊緣但不要接觸菌苔分別垂直向外劃直線（圖Ⅸ-3，2）接種大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌。

5．倒置于37℃溫室培養24小時。

6．觀察結果。

五、實驗報告

1．結果

繪圖表示并說明產黃青霉所產生的青霉素對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的抑菌效能。