不論你是剛入實驗室養細胞的萌新，還是有著數十年細胞培養經驗的大牛，都會碰到細胞生長速度緩慢、形態變差、細胞脫壁、邊緣萎縮等許多問題，明明已經為細胞“鞍前馬后”、關懷備至，但各種意外還是頻頻發生。出現以上狀況，你的細胞很可能是營養不良了。

細胞在體內依附于機體生長，由血液循環提供能量和物質，在體外培養細胞則需要基礎培養基營造生長環境，并由血清提供細胞生長所需的營養物質，因此血清的質量好壞直接影響細胞生長狀態。所謂“一招不慎，滿盤皆輸”，今天小編就跟大家聊聊在細胞培養中如何選擇優質的血清？

要想挑選合適的血清，首先我們需要了解血清，血清是什么？血清是指血液凝固后，去除血漿中纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色澄清液體。血清是細胞培養中用量最大的天然培養基，含有豐富的細胞生長必須的營養成分，發揮著極為重要的功能。血清含有各種氨基酸、維生素、無機物、脂類物質等維持細胞生長必須的營養物質，也含有胰島素、氫-化可的松、地塞-米松、bFGF、EGF、PDGF、轉鐵蛋白等可促進細胞生長的激素、生長因子及結合蛋白。此外，血清還有解毒、緩沖、抑制蛋白酶活性等作用保護細胞不受傷害。

接下來小編就從血清的分類、血清的來源和制作工藝、血清的檢測標準三個環節給大家講一講如何挑選血清。

一、 胎牛or新生牛or小牛血清？傻傻分不清

血清的不同成分及其含量會因供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件的不同而有所差異。按照牛是否出生及出生時間的長短，可將牛血清分為胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清和供體牛血清。國內外對不同等級牛血清的定義有所區別，國際上主要參考歐洲藥典和美國藥典頒布的指南，國內則以2015版《中華人民共和國藥典》（以下簡稱中國藥典）為標準。中國藥典僅對新生牛血清做出了規定（表1 國內外對不同等級牛血清的定義）。



表1，國內外對不同等級牛血清的定義

· 胎牛血清：胎牛在母體內與外界隔絕，通過心臟穿刺采血，血清中營養成分和細胞因子含量高、異源物質少，品質最佳，是科學研究中最常使用的血清，適用于絕大多數原代細胞和細胞系；

· 新生牛血清：新生牛出生后控制在一定的時間內采血，成分上比較接近胎牛血清，且來源相較于胎牛血清更加充足，性價比更高，適合培養比較容易生長的腫瘤細胞系，可以滿足有大規模生產血清需求的企業。中國藥典和歐美藥典對于新生牛出生時間的定義存在一定差異；

· 小牛血清、成牛血清：隨著小牛的生長發育，血清成分會發生變化，如免疫球蛋白含量增加，血清所含的促細胞生長因子、激素及其他活性物質的組份與比例也不同。該類血清異源物質增多，成分也比較復雜，所以對細胞培養的干擾因素比較多，因此小牛血清和成牛血清一般不用于細胞培養，更多用作封閉液、稀釋液等；

· 供體牛血清：是通過對牛群來源管控、物?隔離和檢驗檢疫，減少外源因子的污染，且利用活體反復采血的方法來生產牛血清，主要作為醫藥生產用血清。

選擇合適的血清，既要考慮到細胞需求，也要考慮性價比。現如今，國際上對不同等級血清的劃分標準和管控要求越發嚴格，分級使用血清已逐漸為各行各業所認可。

二、源頭放心+工藝安心=品質稱心

牛血清是一種純天然產物，因此牛源健康狀況和生長環境就尤為重要。世界動物衛生組織（OIE）對一個國家或地區動物感染疾病（如瘋牛病）的可能性有一個評價指標，稱為地域性瘋牛病風險評估（GBR），它將每個國家或地區的瘋牛病風險進行分類和監控，以避免瘋牛病的傳播。從官方數據來看，澳洲、部分南美洲和北美洲國家沒有瘋牛病（BSE）和口蹄疫（FMD）疫情，目前中華人民共和國海關總署允許進口的牛血清產地只有澳大利亞、新西蘭和烏拉圭，市面上其他血源地的牛血清都是非法走私血清。

走私血清“魚目混珠”，缺乏檢驗檢疫監管，生產、冷鏈運輸無法保障，批內和批間穩定性無法控制，導致細胞培養過程狀況頻發，甚至損失珍貴的細胞；其次，很多走私的牛血清來自發生過瘋牛病疫情的國家，未經檢疫的血清中可能攜帶傳染病毒，對研究和生產人員的生命健康以及下游產品帶來重大威脅。