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植物組織培養中外植體的選擇

2021-03-25 11:18 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
外植體是組織培養中的各種接種材料。包括植物體的各種器官、組織、細胞和原生質等。

植物從低等的藻類到苔蘚擅《類、種子植物等高等植物的各類、各部分器官都可作為組織培養的材料,一般裸子植物多采用幼苗、芽、韌皮部細胞,被子植物采用胚、胚乳、子葉、幼苗、莖尖、根、莖、葉、花藥、花粉、子房和胚珠等各個部分。因此,外植體的選擇需要從植物品種、適當的時期、大小、外植體來源、消毒難易等方面子以考慮。

1.選擇優良的種質及母株

無論是離體培養繁殖種苗,還是進行生物技術研究,培養材料的選擇都要從主要的植物入手,選取性狀優良的種質、特殊的基因型和生長健壯的無病蟲害植株。尤其是進行離體快繁,只有選取優良的種質和基因型,離體快繁出來的種苗才有意義,才能轉化成商品;生長健壯無病蟲害的植株及器官或組織代謝旺盛,再生能力強,培養后容易成功。

2.選擇適當的時期

植物組織培養選擇材料時,要注意植物的生長季節和生長發育階段,對大多數植物而言,應在其開始生長或生長旺季采樣,此時材料內源激素含量高,容易分化,不僅成活率高,而且生長速度快,增殖率高。若在生長末期或已進入休眠期時采樣,則外植體可能對誘導反應遲鈍或無反應。花藥培養應在花粉發育到單核靠邊期取材,這時比較容易形成愈傷組織。百合在春夏季采集的鱗莖、片,在不加生長素的培養基中,可自由地生長、分化;而其他季節則不能。植物的腋芽培養,如果存1~2月間采集。則腋芽萌發非常遲緩;而在3~8月間采集,萌發的數目多,萌發速度快。

3.選取適宜的大小

培養材料的大小根據植物種類、器官和目的來確定。通常情況下,快速繁殖時葉片、花瓣等面積為5mm2,其他培養材料的大小為0.5~1.0cm。如果是胚胎培養或脫毒培養的材料,則應更小。材料太大,不易徹底消毒,污染率高;材料太小,多形成愈傷組織,甚至難以成活。

4.外植體來源要豐富

為了建立一個高效而穩定的植物組織離體培養體系,往往需要反復實驗,并要求實驗結果具有可重復性。因此,就需要外植體材料豐富并容易獲得,一般從野外或溫室中選取生長健壯的無病蟲害的植株器官或組織作外植體,離體培養容易成功。蕞好對所要培養的植物各部分器官的分化能力先進行比較,再篩選蕞易再牛的部位作為蕞佳外植體,如同一種百合鱗莖的外層鱗片要優于內層鱗片,下段鱗片要優于上、中段鱗片。對多數植物來說,莖尖是較好的選擇,但往往數量有限,也可常用莖段、葉片作外植體,如菊花、秋海棠等;還可選擇鱗莖、球莖、根莖、花莖、花瓣、根尖、胚等作為外植體進行培養。

5.外植體要易于消毒

在選擇外植體時,應盡量選擇帶雜菌少的器官或組織,降低初代培養時的污染率。一般地上組織比地下組織、一年生組織比多年生組織、幼嫩組織比老齡和受傷組織容易消毒。
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