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常用細菌培養基制備及注意事項

2021-04-08 10:39 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑

實驗方法原理 培養基是人工合成的一種混合營養料,用于分離培養細菌。常用的有基礎培養基、營養培養基、鑒別培養基、選擇培養基等。

試劑、試劑盒

牛肉/膏 蛋白胨 氯化鈉 蒸餾水 瓊脂 NaOH 酚紅指示劑

儀器、耗材

pH 試紙 三角燒瓶 量筒 天平 吸管

實驗步驟

1.  稱取牛肉/膏3 g,蛋白胨10 g,氯化鈉5 g 加入1 000 ml 蒸餾水中,加熱溶化。

2.  待冷至40-50℃時,測定并矯正酸堿度為pH7.6。通常未矯正前的肉膏湯均呈酸性,故常用1/10 M NaOH 溶液進行矯正。

3.  酸堿度調整后,煮沸3-5 分鐘,補足因蒸發失去的水量,待冷卻后用濾紙使之過濾澄清。并重新測定酸堿度一次,若變動較大,應再進行矯正。

4.  按應用時的需要量分裝于適當的試管或燒瓶內,塞上硅膠塞并用牛皮紙包扎,置高壓蒸汽滅菌器內,經103.4 kpa、121.3℃、20 分鐘滅菌。

5.  滅菌后取出培養基,待冷至40℃以下時,放入37℃溫箱24 小時做無菌試驗,如無菌生長,即可備用。

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