多聚甲醛溶液(4% PFA,電鏡專用)操作步驟
2021-04-26 14:28 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:多聚甲醛溶液(4% PFA,電鏡專用)
規格:500ml
儲存條件:4℃,12個月
組分:主要由4%多聚甲醛、磷酸鹽組成,pH值為7.4。
用途:組織和細胞常用的固定液
簡介:固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦味酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
多聚甲醛溶液(4%+PFA,電鏡專用)主要由優質多聚甲醛、磷酸鹽、去離子水組成,pH為7.4,適合于絕大多數組織和細胞的電鏡固定,是免疫組織化學和培養細胞固定中蕞常用的固定液之一,它能較好的保護組織和細胞的形態結構以及核酸。
操作步驟:
1、一般組織固定時間控制,大標本應適當延長固定時間,培養細胞或細胞爬片固定時間控制,特殊情況除外。
2、10×10ml、10×30ml規格的產品,可固定后直接放入試劑瓶,4℃長期保存。
注意事項:
1、多聚甲醛溶液(4%+PFA,電鏡專用)有一定刺激性和腐蝕性。一經開啟,儲存過久固定效果易下降。
2、避免過度延長固定時間,否則引起生物大分子過度交聯。取材厚度不同,固定時間也不同。
3、固定液的容量應足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應大于10:1。
4、溫度對固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但溫度不宜過高。
5、取出新鮮組織后應及時固定,無法及時固定時,應保存于生理鹽水中及時送檢。