哺乳動物穩(wěn)定細胞株篩選常見問題

1、為什么要構建穩(wěn)定細胞株
答：對于少量、臨時的實驗，瞬時轉染是完全符合需求的，但是如果試驗中需要長期大量的使用某種細胞，我們就需要構建穩(wěn)定細胞株，構建穩(wěn)定細胞株的好處在于
1、可以減少不同批次實驗中轉染效率差異帶來的實驗結果差異，提高實驗的可重復性。
2、構建好細胞系后不必再進行瞬時轉染實驗以及反復制備質(zhì)粒，減少工作量。
3、不再使用價格高昂的轉染試劑，節(jié)約實驗成本。

2、所有的細胞株都可以構建穩(wěn)定細胞系嗎？
答：不是所有的細胞株都能構建成為穩(wěn)定細胞系的。構建穩(wěn)定細胞系需要滿足2個條件：
1、細胞能穩(wěn)定傳代；
2、細胞的轉染效率滿足要求。遠慕生物主要是為科研及工業(yè)用戶構建過表達細胞株，采用的主要是CHO細胞和293細胞。

3、構建好的穩(wěn)定細胞系如何培養(yǎng)和保存？
答：我們提供的單克隆和多克隆細胞系培養(yǎng)和保存均與原來的細胞株無異，無需抗生素維持。

4、單克隆和多克隆細胞株的區(qū)別是什么？
答：單克隆細胞是轉染目的基因后經(jīng)過克隆篩選得到的，由一個細胞擴增形成的細胞株，目的基因整合的位置和拷貝數(shù)都是一致的，可以長期維持表達量不變。多克隆細胞是轉染目的基因后直接經(jīng)抗藥基因篩選得到的。是多種陽性細胞克隆的混合。在長期的培養(yǎng)過程中產(chǎn)量由可能會發(fā)生變化。