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糖原PAS染色液(真菌專用)操作步驟

2021-05-27 13:39 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
中文名稱:糖原PAS染色液(真菌專用)
產品規格:3×20mL|3×50mL
用途:大多數真菌染色(曲菌、白色念珠菌、組織胞漿菌、馬爾尼菲青霉菌、新型隱球菌等)
注意事項:又叫真菌染色液(McManus PAS法),尤其適用于曲菌、白色念珠菌染色。真菌呈紫色,胞核呈藍色。
儲存條件:4℃,避光,12個月

產品簡介:糖原染色是病理學中常規的染色方法之一,McManus在1946年最先使用PAS技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該技術不僅能顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。糖類及有關物質中的1,2-乙二醇基被氧化為二醛,醛與Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。氧化劑還可氧化細胞內其他物質,使用時應注意選擇好氧化劑濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。

糖原PAS染色液(真菌專用)利用真菌含有多糖,氧化劑氧化真菌壁上的多糖而暴露出醛基,醛基與無色Schiff結合呈現紅色。該染色法性能穩定,特異性強;操作簡捷,僅需0.5h;濃度低氧化劑更適用于對真菌染色,無鹽酸乙醇分化液分化步驟。

操作步驟(僅供參考):
1、常規固定(常采用10%福爾馬林),常規脫水包埋。
2、細胞涂片入蒸餾水(無需包埋、脫蠟)或組織切片脫蠟入蒸餾水。
3、入氧化劑室溫氧化10min。
4、自來水沖洗2次,蒸餾水浸洗2次。
5、入SchiffReagent并加蓋,置于室溫陰暗處浸染10~20min。
6、亞硫酸鈉溶液滴洗2次,每次2min。
7、流水沖洗2min。
8、逐級常規乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。

染色結果:
真菌    紫紅色
細胞質  深淺不一的紅色
備注:顏色深淺很大程度上取決于樣品在氧化劑和SchiffReagent中作用時間的長短。

陰性對照(可選):
1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml,處理30~60min,與其他樣本共同入氧化劑。結果應為陰性。
2、(備選方案)取唾液片(過濾后用)處理30~60min,與其他樣本共同入氧化劑。結果應為陰性。
3、(備選方案)如果對照片采用其自身樣本,對照片不經氧化劑這一步,直接入SchiffReagent。結果應為陰性。
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