一、概念與臨床意義

冷凝集實驗主要用于由肺炎支原體引起的原發性非典型性肺炎的輔助診斷。參考值：凝集價≤1：32；臨床意義：由肺炎支原體感染引起的原發性非典型性肺炎患者的血清中常含有較高的寒冷紅細胞凝集素，簡稱冷凝集素，它能與患者自身紅細胞或“O”型人紅細胞于4℃條件下發生凝集，在37℃時又呈可逆性完全散開。75％的支原體肺炎病人，于發病后第二周血清中冷凝集素效價達1：32以上，一次檢查凝集價>1：64或動態檢查升高4倍以上時，有診斷意義。

二、實驗操作步驟

玻璃試管10支，分別加入生理鹽水200微升，第一支加入待測血清200微升，混勻后取出200微升加入第二支試管，依次倍比稀釋到第九支試管，取出200微升棄去；同時準備好2%“O”型紅細胞500微升，操作離心后“O”型紅細胞用生理鹽水洗滌3次，取離心洗滌后的紅細胞100微升加入4.9毫升的生理鹽水中即可。最后加入200微升配好的紅細胞到10支試管中，混合后放入4℃冰箱中3小時后判斷凝集現象。

三、冷凝集實驗相關知識

1、多數正常人體內都有低效價的自身冷凝集素，但效價低，反應溫度范圍也小，無臨床意義。

2、有臨床意義的自身冷凝集素一般有高效價和反應溫度范圍高的特點，可致自身免疫性溶血，如CAS.它的發生可能是急性或慢性的。急性常繼發于淋巴組織增生如淋巴瘤或肺炎支原體感染；慢性的常在老年人中發生。天氣冷時可發生雷諾現象和血紅蛋白尿。

3、冷反應性自身冷凝集素通常是IgM，當外周循環溫度比較低時，結合到紅細胞上，并且使得補體致敏紅細胞。當紅細胞循環回到溫暖部位時，IgM從紅細胞上放散下來，但是補體被保留著。在循環紅細胞上出現的補體成分是C3，有些是C4.所以在幾乎所有的病例中，補體是紅細胞上唯一要測定的蛋白。

4、在極少的病例中冷反應性自身抗體是IgG，它可能不結合補體。如果在DAT的所有階段在冷條件下進行，使用冷鹽水和冷抗球蛋白試劑，否則IgG可能被遺漏掉。

5、自身冷抗體的特異性可能是抗-HI、抗-I、抗-i，罕見抗-Pr或其他(Gd，SdX)特異性。