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穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物/標(biāo)記物分析介紹

2021-07-01 10:04 作者:洛辰 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
同位素標(biāo)記 (同位素內(nèi)標(biāo))較于其同種元素的未標(biāo)物具有質(zhì)子數(shù)相同中子數(shù)變化的特點(diǎn),通過(guò)用同位素取代特定原子來(lái)標(biāo)記反應(yīng)物,然后使反應(yīng)物進(jìn)行反應(yīng),并檢測(cè)中子數(shù)變化的原子,可通過(guò)反應(yīng)、代謝途徑或細(xì)胞跟蹤同位素。

同位素內(nèi)標(biāo)物與對(duì)應(yīng)的未標(biāo)物理化性質(zhì)相似,通過(guò)光吸收和免疫的方法無(wú)法區(qū)分,在色譜中如果將同位素內(nèi)標(biāo)物與對(duì)應(yīng)的未標(biāo)物用同樣的檢測(cè)方法,其保留時(shí)間也幾乎一致,無(wú)法分辨。

穩(wěn)定性同位素內(nèi)標(biāo)是質(zhì)譜方法即穩(wěn)定性同位素稀釋法du有的,在質(zhì)譜(Mass)中,如果加進(jìn)同位素內(nèi)標(biāo),那測(cè)出來(lái)的值較未標(biāo)物有很大的差值,質(zhì)譜能把同位素內(nèi)標(biāo)和要檢測(cè)的物質(zhì)區(qū)分開(kāi)。

可供多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo),包括2H (氘標(biāo) D) 、13C、15N、17O、18O、34S等,放射性的同位素內(nèi)標(biāo)具有較大的傷害性,一般穩(wěn)定性同位素可以完成的建議優(yōu)-選穩(wěn)定性同位素內(nèi)標(biāo)物,若被檢測(cè)物是穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物對(duì)應(yīng)的未標(biāo)物,那么,較被檢測(cè)物而言,對(duì)應(yīng)的同位素標(biāo)記物只是將部分氫原子(1H)、碳原子(12C)或氮原子(14N)等被2H (氘、D)、13C、15N所取代,被檢測(cè)物與對(duì)應(yīng)的穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物理化性質(zhì)基本一致,尤其在色譜中,幾乎無(wú)法區(qū)分。

同樣是穩(wěn)定同位素標(biāo)記,13C、15N相對(duì)來(lái)說(shuō)比2H(氘標(biāo)) 更好,所以氘標(biāo)(D、2H)一般也相對(duì)而言更便宜,色譜定量中,2H、13C、15N標(biāo)記的差別不大,如果需要質(zhì)譜(MS)或者核磁(NMR)定量,一般建議優(yōu)-選13C或者15N標(biāo)記。

目前同位素內(nèi)標(biāo)廣泛應(yīng)用于檢測(cè)中:包括維生素檢測(cè)、膽汁酸檢測(cè)、激素檢測(cè)、兒茶酚胺檢測(cè)等。
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