一、從土壤中分離放線(xiàn)菌

1.制作高氏一號(hào)培養(yǎng)基，趁熱注入培養(yǎng)皿中，凝成平板，待用。

2.稱(chēng)取土壤10克，放入裝有100毫升無(wú)菌水的錐形瓶中，并加入10%酚10滴，以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。振蕩10分鐘，制成10-1菌懸液。按照連續(xù)稀釋分離法，進(jìn)一步制成10-3菌懸液。

3.用移液管吸取0.1毫升10-3菌懸液，注入平板培養(yǎng)基上，用無(wú)菌玻璃刮刀將菌懸液均勻涂抹在整個(gè)培養(yǎng)基上。然后將培養(yǎng)皿倒置于25-30℃溫箱中，培養(yǎng)7-10天，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)微生物菌落。如果菌落的硬度較大，干燥致密，且與基質(zhì)緊密結(jié)合，不易被針挑起，這就是放線(xiàn)菌菌落。

4.挑取放線(xiàn)菌菌落，接種于斜面培養(yǎng)基上。

二、從土壤中分離霉菌

1.制作豆芽汗葡萄糖培養(yǎng)基，并添加80%乳酸數(shù)滴，以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。將培養(yǎng)皿中，凝成平板，待用。

2.稱(chēng)取10克土壤，按上述分離放線(xiàn)菌的方法制成10-4或10-5的菌懸液。

3.取0.1毫升菌懸液注入培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)基上，用玻璃刮刀涂抹均勻。然后將培養(yǎng)皿倒置于25-30℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)3-4天。培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)微生物菌落。霉菌菌落常長(zhǎng)成絨狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀，可根據(jù)這一特征尋找霉菌菌落。

4.挑取培養(yǎng)皿內(nèi)的霉菌菌落接種于斜面培養(yǎng)基上

三、從飲水中分離大腸桿菌

1.制作伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，趁熱注入培養(yǎng)皿中，凝成平板，待用。

2.用滅過(guò)菌的錐形瓶盛取河水或溝水，按1:10稀釋。

3.取0.1毫升稀釋液接種于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上。用平板劃線(xiàn)分離法進(jìn)行分離。

4.將劃線(xiàn)后的培養(yǎng)皿倒置37℃溫箱中培養(yǎng)18-24小時(shí)。培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)大腸桿菌菌落，菌落中心呈暗藍(lán)黑色，發(fā)金屬光澤。

5.將菌落接種于斜面培養(yǎng)基上（由營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基制成）。