細胞培養(yǎng)實驗中，培養(yǎng)基有著不可取代的地位。大家知道，血清是的天然培養(yǎng)基，而無血清培養(yǎng)基也有著功不可沒的作用，被廣泛的應用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體，病毒抗原和重組蛋白等。遠慕生物為您分析解說無血清培養(yǎng)基在細胞培養(yǎng)實驗中的適應性：

一、適應方法

1.直接適應細胞從血清的培養(yǎng)基為基。

2.連續(xù)的適應或脫機細胞從血清的培養(yǎng)基為SFM在幾個步驟。

連續(xù)的適應往往是細胞比直接適應嚴酷少。

二、連續(xù)的適應

通道1，75%血清的培養(yǎng)基：25%基

通道2，50%血清的培養(yǎng)基：50%基

通道3，25%血清的培養(yǎng)基：75%基

從75%到100%的變化可能是太緊張的SFM細胞，可能需要把細胞2–3通道在10%血清的培養(yǎng)基：90% SFM混合物。大多數的細胞系可以被認為是完全適應后100% SFM 3通道。有時你可能會得到你過去的某一步甚至細胞之前100% SFM有麻煩。如果發(fā)生這種情況，回去和傳代細胞2–3次血清前比補充媒體的無血清培養(yǎng)基。

三、對無血清培養(yǎng)的思考

總的來說，在無血清培養(yǎng)細胞的滲透壓，pH，溫度，機械力極端敏感，酶處理。

1.抗生素

不要在無血清培養(yǎng)基中使用抗生素。如果你這樣做，我們建議您使用5到10倍不到你會在血清培養(yǎng)基中。這是因為血清蛋白會結合一定量的抗生素添加；沒有這些血清蛋白抗生素的水平可能是某些細胞的毒性。

2.高密度

細胞必須與活力> 90%適應中的生長對數期。連續(xù)的適應可能是必要的。播種文化在一個更高的密度比正常在各通道在SFM適應可以幫助過程。因為有些部分的細胞不可能在新的文化環(huán)境中生存，有更多的細胞會增加活細胞數進一步通道。

3.叢生

細胞聚集往往發(fā)生在適應SFM。我們建議你輕輕地成團塊打破他們當傳代細胞。

4.形態(tài)

這是不尋常的在適應SFM后見細胞形態(tài)略有變化。只要倍增時間和細胞活性保持良好，在形態(tài)上的細微變化，不應該是一個值得關注的理由。

四、對培養(yǎng)的適應

為適應SFM的另一種方法涉及使用“條件培養(yǎng)基”。介質的細胞已生長在一個完整的通道，如果您選擇這種方法，可以促進適應如下：

通道1，100%血清的培養(yǎng)基

通道2通道50%中從1:50左右SFM

通道3通道50%中從2:50左右SFM