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布氏桿菌染色液實驗步驟

2021-09-29 14:57 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
中文名稱:布氏桿菌染色液
規(guī)格:2×50ml/2×100ml
保存條件:室溫,避光,12個月
用 途:布氏桿菌染色,又稱為科茲洛夫斯基染色或柯茲洛夫斯基染色。
注意事項:染色結(jié)果為:布氏桿菌呈球桿狀,淡紅色,其他呈綠色。

產(chǎn)品簡介:
布氏桿菌(Brucella)是一種革蘭氏陰性的不運動細菌,牛、羊、豬等動物最易感染。布氏桿菌染色又稱科茲洛夫斯基染色戒柯茲洛夫斯基染色。布氏桿菌染色液采用沙黃為染色劑,臨床標本直接涂片,背景干凈,胞核胞質(zhì)對比強烈,胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認,細菌染色特征典型。所有操作應(yīng)置于二級生物安全柜中進行,一旦發(fā)現(xiàn)綠色細菌中有紅色點狀細菌,應(yīng)高度懷疑為布氏桿菌,及時通知CDC,防止疫情擴散。

自備材料:
1、接種環(huán)或挑取細菌的其他工具。
2、酒精燈
3、載玻片
4、光學顯微鏡

操作步驟(僅供參考):
1、涂片:取待檢細菌,于載玻片中央涂成薄層,盡量薄。如果需做對照,可以將大腸桿菌與待檢細菌混合涂片。
2、干燥:涂片后在室溫下自然干燥,也可在酒精燈上略加溫,使之迅速干燥。
3、固定:手持載玻片一端,標本面朝上,在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動3~5次,每次1s,溫度不宜過高,防止菌體蛋白變性,放置待涼后染色。
4、染色:滴加沙黃染色液染色,在酒精燈的火焰上微微加熱至出現(xiàn)蒸汽為止,通常需要30~60s。
5、清水洗去染色液。
6、復(fù)染:滴加復(fù)染液染色2~3min。
7、水洗,吸干。
8、鏡檢。

染色結(jié)果:
布氏桿菌  紅色
大腸桿菌或其他菌  綠色

注意事項:
1、涂片之前應(yīng)事先在背面做好圓圈標記,以便判斷后續(xù)試驗的位置。
2、取細菌時,應(yīng)注意自我防護,拔或塞試管塞時,應(yīng)將試管口通過火焰略加燒灼,最后將接種環(huán)在火焰上燒灼滅菌,
3、加熱固定涂片時,應(yīng)注意玱片勿太靠近火焰,一般要求玱片溫度不超過60度,以玱片背面觸及手背皮膚不覺過燙為宜。
4、待檢細菌培養(yǎng)時間也會影響染色,陽性菌培養(yǎng)時間過長戒已死亡戒細菌溶解,都常呈陰性反應(yīng)。
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