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賴氨酸脫羧酶培養基配制方法

2021-12-17 14:41 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:賴氨酸脫羧酶培養基
英文名稱:Lysine-decarboxylase Test Broth
產品規格:10g
用途:用于細菌賴氨酸脫羧酶試驗。

成分(g/L)
酵母浸粉             3.0
L-賴氨酸             5.0
葡萄糖               1.0
溴甲酚紫           0.016
pH值6 .7 ± 0.1     25℃

配制方法:
將蛋白胨、肉膏、葡萄糖、瓊脂及吡哆醛溶化后,調整pH為6.0~6.3。再按量加入溴甲酚紫和甲酚紅。在每100ml基礎培養基內,分別按1%加入L-賴氨酸。另100ml基礎培養基不加氨基酸作為對照。加入氨基酸后再調整pH至6.0~6.3,分裝小試管,15磅15分鐘滅菌,置高層。使用前,表面覆蓋一層滅菌液體石蠟。

賴氨酸脫羧酶培養基用于細菌生化試驗。其中蛋白胨、酵母粉提供氮源,葡萄糖提供碳源,溴甲酚紫作為酸堿指示劑,L-賴氨酸作為反應底物。具有氨基酸脫羧酶的細菌,能分解氨基酸使其脫羧生成胺(賴氨酸→尸胺)和二氧化碳,使溶液為堿性,溴甲酚紫保持紫色。如果不脫羧,腸桿菌科的細菌能分解葡萄糖,產酸,溴甲酚紫變為黃色。

氨基酸脫羧的對照管為葡萄糖發酵管,不含氨基酸,由于實驗結果陽性的為保持紫色不變,陰性結果為黃色,為保證結果的可靠性,須同時接種對照管,如對照管變為黃色,說明細菌接種成功,證實試驗管紫色(不變色)為陽性,而非未接種好細菌。此外,由于氨基酸脫羧的產物為尸胺、腐胺等,遇氧不穩定,故各管接種完細菌后,需加入幾滴液體石蠟隔絕空氣,保持胺的穩定性。
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