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雙縮脲試劑(AB液)操作步驟

2021-12-22 14:28 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:雙縮脲試劑(AB液)
規格:100ml/500ml
分類:蛋白檢測
儲存條件:室溫,12個月
用途:較為粗略的驗證蛋白質的存在方法,多用于定性檢測蛋白質
注意事項:如果組織里含有蛋白質或具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應,顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

簡介:
雙縮脲是一種用于分析蛋白質的方法,雙縮脲反應的原理是在呈藍色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復合物,呈紫色。所產生的顏色密度與參與反應肽鍵數成比例,可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為。雙縮脲法測定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離子螯合劑影響,對于血清總蛋白的雙縮脲分析,膽紅素、脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用。
雙縮脲試劑(AB液)由Biuret Reagent A、Biuret Reagent B組成,如組織里含有蛋白質或具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應,顏色深淺與蛋白質濃度成正比。該試劑是較為粗略的驗證蛋白質存在的方法,多用于定性檢測蛋白質。

操作步驟(僅供參考):
1、先將BiuretReagentA3ml加入待測樣品3ml,振蕩均勻,以便產生堿性環境。
2、加入2~3滴BiuretReagentB,振蕩均勻,如果組織里含有蛋白質或具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可不雙縮脲試劑產生紫色反應,顏色深淺不蛋白質濃度成正比。
3、如果想采用分光光度計或酶標儀測定,應于540nm波長處的吸光值,如無540nm,520~562nm之間的波長也可,根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。

注意事項:
1、待測蛋白和蛋白標準加入雙縮脲試劑后,如果収現檢測效果丌佳,可以室溫放置1h或60℃放置15min,顏色會隨著時間的延長丌斷加深。顯色反應也會隨溫度升高而加快。
2、檢測中収現所有孔都呈暗紫色,可能原因是樣品含有還原劑,應適當透析或稀釋樣品。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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