中文名稱(chēng)：辛基-瓊脂糖凝膠4FF
英文名稱(chēng)：Octyl-Sepharose 4FF
產(chǎn)品規(guī)格：25ml

辛基-瓊脂糖凝膠4FF是將辛基鍵合在瓊脂糖凝膠上形成的一種可利用疏水作用來(lái)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)產(chǎn)品純化分離的中等疏水類(lèi)介質(zhì)。適合各種蛋白的分離和純化。具有流速快，使用方便，應(yīng)用廣泛的特點(diǎn)。

技術(shù)參數(shù)：
基質(zhì)：6%交聯(lián)瓊脂糖凝膠
配基：正丁烷基n-Octyl
配基密度：5μmol/mL
顆粒大小：45～165μm
最大流速：600cm/h
工作pH：pH3.0～13.0
操作溫度：室溫
儲(chǔ)存條件：4～28℃

使用方法：
1．裝柱
① 將所有的試劑和填料達(dá)到室溫.配制初始緩沖液(平衡液)和緩沖液。
② 根據(jù)柱子大小取所需凝膠的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠:緩沖液=3:1比例）配成勻漿。
③ 將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液體（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
④ 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意不要使用氣泡。打開(kāi)柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。
⑤ 打開(kāi)蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò)，使柱床穩(wěn)定。用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

2．平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過(guò)柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液，如：0.02～0.05mol/L的PBS加1～2.5mol/L(NH4)2SO4等。

3．上樣
① 樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心、過(guò)濾后上柱；
② 一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡洗液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
③ 介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和溫度。溫度越大、鹽濃度越高或樣品組分疏水性越強(qiáng)，介質(zhì)對(duì)組分吸附越牢。

4．洗脫
疏水介質(zhì)可用減小鹽濃度進(jìn)行洗脫。加表面活性劑或者有機(jī)溶劑可加強(qiáng)洗脫。最常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液，如：0.02～0.05mol/L的PBS。

5．再生
一般用低鹽濃度的緩沖液洗，洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。若有失活的蛋白或者脂類(lèi)物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

6．在位清洗
① 對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M NaCl去除。
② 對(duì)沉淀蛋白、以疏水作用結(jié)合的蛋白或者脂類(lèi)物質(zhì)，可用1M  NaOH去除。
③ 對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類(lèi)等，可用4～10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。清洗完畢后，用至少3倍柱體積緩沖液平衡柱子。

7．去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5～6小時(shí)或者用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下步驟去除：
① 2倍柱體積的70%的乙醇；
（2)2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5
③ 1倍柱體積4M尿素
④ 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M NaCl;
以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。

8．消毒
用0.5～1.0M NaOH室溫下洗8～10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

注意事項(xiàng)：
1．密封貯存于4～28℃（保存溶液為20%乙醇+0.1M醋酸鈉），通風(fēng)、干燥的地方，不能冷凍。用過(guò)的柱子貯存于4℃（20%乙醇）。
2．在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。