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軟骨染色液(阿利新藍法,pH1.0)操作步驟

2022-03-03 13:29 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑

產品簡介:
阿利新藍(Alcian)又稱愛先藍或阿爾辛藍等,是一種類銅鈦花青共軛染料,最初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團結合,也即阿爾辛藍與組織內含有的陰離子基團如
羧基和硫酸根形成不溶性復合物。阿利新藍由中央含銅的酞菁環與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成,該異硫脲基呈中度堿性,使阿利新藍帶陽離子。pH 值為 2.5 時,組織內的羧基電離,帶有一個負電荷,與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵,使帶有羧基的酸性黏液物質(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。pH 值為 1.0 時,組織內的硫酸根電離,帶有一個負電荷,與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵,使帶有硫酸根的組織(如硫酸黏液物質)染色。
軟骨染色液(阿利新藍法,pH1.0)利用染液的不同 pH 值可區分粘液物質的類屬,pH 為 1 時,羧基(COOH)不著色,硫酸基(OSO3H)著色,pH 為 2.5 時,羧基染色良好而硫酸粘液著色不佳,使硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白著色。本試劑僅適用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

產品組成:
試劑(A): Alcian 酸化液 50ml RT
試劑(B): Alcian 染色液(pH1.0) 50ml 4℃ 避光

 
 

 
自備材料:1、 系列乙醇 2、 蒸餾水

操作步驟(僅供參考)
1、常規脫鈣,二甲苯脫蠟,通過梯度乙醇后,入蒸餾水再水化。
2、入 Alcian 酸化液浸泡 3min。
3、入 Alcian 染色液染色 30min。
4、 流水沖洗 5min.
5、梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。

 染色結果:
硫酸黏液物質(羧基) 藍色
細胞核 淡藍色

 
 
注意事項:
1、 固定液采用 10%中性福爾馬林。
2、該法可區分鑒別硫酸黏蛋白和蛋白多糖,其 pH=1.0。
3、已開封試劑應在開封后 6 個月內使用完,每次用后應及時擰緊瓶蓋,以免揮發或變質。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個月有效。
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