多聚賴氨酸溶液(1×PLL,0.1mg/ml)操作步驟
2022-03-04 13:46 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
多聚賴氨酸溶液(1×PLL,0.1mg/ml)
產(chǎn)品簡介:
多聚賴氨酸溶液英文名為 Poly-L-lysine Solution 簡稱 PLL。Leagene Poly-L-lysine為 Poly-L-lysine hydrobromide , 分 子 式 為 L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys ? xHBr , 分 子 量 為150,000~300,000,CAS Number 25988-63-0。PLL 是一種粘附劑,常用于載玻片的包被,可以直接稀釋后用于細(xì)胞或組織培養(yǎng)方面的實(shí)驗(yàn)。分子量大于 70,000 的多聚賴氨酸可以促進(jìn)細(xì)胞貼壁生長,本產(chǎn)品可以用于促進(jìn)細(xì)胞的貼壁生長和核酸雜交。制備好的載玻片可 4℃保存半年。
產(chǎn)品組成:
Poly-L-lysine Solution(0.1mg/ml) 50ml
操作步驟(僅供參考):
1、用于細(xì)胞培養(yǎng)
1 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要 Poly-L-lysine Solution 稀釋至適當(dāng)濃度溶液后即可使用。不同的細(xì)胞,Poly-L-lysine Solution 包被(Coating)的時(shí)間和濃度,甚至稀釋液的選擇有所不同,請自行參考相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行適當(dāng)?shù)陌弧?br>
②Poly-L-lysine Solution 用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),包被至少 5min,有些實(shí)驗(yàn)需要包被 1~2h,有些情況則需要包被過夜。
③包被完成后,吸 Poly-L-lysine Solution,自然干燥培養(yǎng)器皿,至肉眼觀察完全干燥。通風(fēng)櫥內(nèi)吹風(fēng)數(shù)分鐘即可完成干燥,對于有些實(shí)驗(yàn)則需要干燥 2h 或更長時(shí)間。干燥時(shí)間較長通常會更加有利于后續(xù)的細(xì)胞粘附。
④進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),也可以用水、PBS 或培養(yǎng)液等適當(dāng)溶液潤洗后再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
2、用于核酸雜交
1 方法一:取事先準(zhǔn)備好的載玻片或蓋玻片經(jīng) 160℃冷卻至室溫,在 Poly-L-lysineSolution 上下浸蘸幾下,自然干燥,4℃?zhèn)溆茫嗫墒覝乇4?1 個(gè)月。
2 方法二:Poly-L-lysine Solution 涂于玻片上,自然干燥后即可使用,可用于細(xì)胞涂片和切片。
3 方法三:滴加 5~10μl Poly-L-lysine Solution 至玻片上,用另一蓋玻片以血涂片方法推片或用另一玻片緊貼于其上,相互摩擦以使兩玻片相對的一面涂布上明膠包被溶液。
注意事項(xiàng):
1、Poly-L-lysine 可以被某些細(xì)胞所消化并吸收,攝入過多的 Poly-L-lysine 會產(chǎn)生一定的細(xì)胞毒性。
2、避免反復(fù)凍融,如果大量使用,可以取適量溶液置于 4℃保存,6 個(gè)月有效。
3、 浸蘸 Poly-L-lysine Solution 時(shí),務(wù)必使玻片完全浸入液體中,否則易使包被不完全產(chǎn)生樣本脫落現(xiàn)象。
4、干燥過程中注意避免塵埃污染。
5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個(gè)月有效。