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硫乙醇酸鹽流體培養基操作步驟

2022-04-06 13:04 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:硫乙醇酸鹽流體培養基
供應商:遠慕生物
產品規格:250g /瓶
產品性狀:淡黃色粉末,有刺激性氣味
產品用途;用于藥品、生物制品無菌檢驗,檢測需氧菌和厭氧菌。
儲存條件:常溫、密封、干燥、避光處
產品有效期:三年
 
成   分  g/L
胰酪胨      15.0
無水葡萄糖   5.0
L-胱氨酸     0.5
瓊脂        0.75
酵母浸出粉   5.0
氯化鈉       2.5
硫乙醇酸鈉   0.5
新配制的0.1%刃天青溶液      1.0mL
最終pH7.1±0.2
 
【配制方法】
稱取本品29.3g,置于1L純化水中,加熱攪拌至完全溶解,分裝,121℃高壓滅菌15min,迅速冷卻。在供試品接種前,培養基氧化層高度不得超過培養基深度的1/3。否則,須經100℃水浴加熱至粉紅色消失(不得超過20分鐘),迅速冷卻,只限加熱一次,并應防止污染。
 
【檢驗原理】
培養基中胰酪胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;無水葡萄糖提供可發酵有糖類更利于生長;氯化鈉維持均衡的滲透壓;硫乙醇酸鈉和L—胱氨酸能有效降低氧化還原電位,防止過氧化物的積累對某些菌產生毒性,同時其硫氫基團有鈍化含砷、汞及其它重金屬防腐劑的抑菌作用;少量瓊脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧氣和還原產物的擴散;刃天青是氧化還原指示劑,氧化狀態呈粉紅色,還原狀態無色。
 
【注意事項】
1、稱取培養基時,請做好必要的防護措施。
2、培養基應置于避光、干燥處保存,使用后應立即旋緊瓶蓋,以免吸潮結塊,如本品出現結塊請勿使用。
3、硫乙醇酸鹽流體培養基的裝量與容器高度的比例應符合培養結束后培養基的氧化層(粉紅色)不超過培養基深度的1/2,如培養結束后培養基的氧化層(粉紅色)超過培養基深度的1/2可適當調整其裝量,或者更換稍小的容器使其在培養結束后氧化層(粉紅色)的高度符合規定。
4、在接種前,氧化層的顏色 (粉紅色) 如果超過培養基深度的 1/3,須經水浴煮沸加熱至粉紅色消失(不超過 20 min),并迅速冷卻(若是鹽水瓶裝,不能迅速冷卻,待溫度降低至60℃,才可放置冷水中降溫。防止瓶子爆裂)。培養基加熱只限一次,并防止被污染。
5、硫乙醇酸鹽流體培養基有少量的的瓊脂,在滅菌后,培養基應呈現無渾濁狀態,如果放置一段時間,出現輕微渾濁,尤其是放入冰箱后,渾濁現象更加明顯。渾濁程度一方面可能與培養基用的瓊脂質量有關,另一方面也可能與滅菌是否徹底有關,應具體分析。如果是前者可考慮更換培養基廠家或批號、或者更換瓊脂,如果是后者則應仔細檢查滅菌操作和滅菌設備。
6、培養基在滅菌后至使用過程中取放應避免搖晃,以免培養基因振動而進入氧氣,影響培養基的使用,接種操作應動作迅速、敏捷,否則暴露在空氣中過長,培養基被氧化。
7、使用后的培養基應在121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
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