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大腸菌群顯色培養基使用方法

2022-06-14 15:21 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
  
產品名稱:大腸菌群顯色培養基
英文名稱:Coliform Chromogenic Medium
供應商:遠慕生物
產品規格:100g
保質期:三年
用途:用于快速、準確檢測大腸菌群,大腸菌群培養24小時,顯藍綠色
應用范圍:大腸菌群顯色培養基是青島海博生物公司改良的培養基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸菌群的快速檢測。大腸菌群顯藍綠色,其它菌顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。

配方(g/L):
特殊營養物質  34.55
顯色劑 0.35
瓊脂      13.0
pH7.0-7.2  25℃
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最/佳的結果。

用法:
稱取本品 47.9g 加入 1000ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。分裝三角瓶,121℃ 高壓滅菌 15 分鐘。取 1ml 制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心,傾入冷卻至 45-50℃ 培養基約 15ml,混勻,凝固后,36℃ 倒置培養 18~24h。或冷卻至 45-50℃ 時,傾入無菌平皿,瓊脂完全凝固后,在 37℃ 的培養箱中倒置放置 1-2 小時,加入適當稀釋度的樣品液 1ml,涂布于培養基上,36℃ 培養 18~24h。

操作步驟:
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養基中混勻或涂布于平板上;
3、36℃ 培養 18~24 h,選用有 30~200 個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸菌群菌落。大腸菌群典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。總大腸菌群=藍綠色菌落;
4、對可疑大腸菌群菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上,36℃ 培養 12-16 小時,挑取單菌落做大腸菌群 BGLB 發酵試驗。

質量控制:
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養 18~24h 小時: 

 質控菌株

 ATCC

 生長情況

 菌落顏色

 單增李斯特氏菌

19114

-/+

無色

 金黃色葡萄球菌

25923

-/+

無色

 大腸桿菌

25922

+++

藍色

 沙門氏菌

14028

+++

無色

陰溝腸桿菌

23355

+++

藍色

 產氣腸桿菌

35029

+++

藍色

弗氏檸檬酸鹽桿菌

43864

+++

藍色

肺炎克雷伯氏菌

10031

+++

藍色


方法的局限性:
本培養基鑒定大腸菌群,少數情況下可能會出現假陽性,但不會出現假陰性,有時可能需做其它補充試驗。
典型特征:
大腸菌群典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。
貯存:
制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效:
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意:
此培養基僅供實驗室使用。
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