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TBX培養基檢驗方法

2022-06-17 15:49 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:TBX培養基
英文名稱:TBX Agar
供應商:遠慕生物
產品規格:100g
保質期:二年
產品用途:用于快速、準確檢測大腸桿菌,培養24小時,大腸桿菌顯藍綠色

TBX培養基是遠慕生物公司改良的培養基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。大腸桿菌顯藍綠色,大腸菌群顯無色,其它菌顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。

成分(g/L):
特殊營養物質  21.4 
顯色劑  0.2 
瓊脂  15.0 
PH6.8±0.2  25℃
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最/佳的結果。

用法:
稱取本品36. 6g加入1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過1分鐘。分裝三角瓶,121℃ 高壓滅菌15分鐘。取1ml制備好的樣品液加入直徑為9cm無菌平皿中心,傾入冷卻至45- 50°C培養基約15ml,混勻,凝固后, 36士1℃倒置18~24h。或冷卻至45°C-50°C時,傾入無菌平皿,瓊脂完全凝固后, 在超凈工作臺中開蓋吹15- 30分鐘,去掉培養基表面水汽,加入適當稀釋度的樣品液1ml, 涂布于培養基上,36士1°C 培養18~24h。

檢驗原理:
特殊營養物質提供微生物生長所需的碳氮源和微量元素,維持均衡的滲透壓,并提供針對革蘭氏陽性細菌的選擇性,特別是桿菌和糞鏈球菌;顯色劑是由發色團和微生物部分可代謝物質組成,在特異性酶靶定作用下,游離出產色因子用于合成細胞使菌落顯示顏色。在TBX培養基上,大腸桿菌菌落顯藍綠色,其它菌顯黃色或無色。

操作步驟:
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液1ml加入冷卻至45- -50°C 顯色培養基中混勻或涂布于平板上;
3、36+1C培養18~24h,選用有30~~200個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍綠色,其它細菌為無色或黃色菌落。總大腸桿菌=藍綠色菌落;
4、對可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上, 36+1C 培養12- 16小時,挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(遠慕有生化鑒定管套裝4種x4套)。

質量控制:
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色。制備好的平板呈無色透明固體。
2 、微生物試驗在 36 ±1℃ 培養18~24h小時:
質控菌株 ATCC 生長情況 菌落顏色
單增李氏菌 19114 -/+ 無色
金黃色葡萄球菌 25923 -/+ 無色
大腸桿菌 25922 +++ 藍綠色
沙門氏菌 14028 +++ 無色
產氣腸桿菌 35029 +++ 無色
陰溝腸桿菌 23355 +++ 無色
方法的局限性:
本培養基鑒定大腸菌群大腸桿菌,少數情況下可能會出現假陽性,但不會出現假陰性,有時可能需做其它補充試驗。

典型特征:
大腸桿菌典型菌落為藍綠色,大腸菌群為無色菌落,其它細菌為無色或黃色菌落。

貯存:
制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8C,注意避光保存。

失效:
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

注意:
此培養基僅供實驗室使用。

TBX培養基的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。
注:回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養基。

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