引物定量不準，出現這種情況的可能性有：

（1）定量錯誤、分裝錯誤、引物抽干或收樣過程中意外丟失。這種可能性有，但是很少，因為作為專業的引物合成公司，生產人員都是經過嚴格的專業培訓，這種錯誤是要求謹慎避免甚至杜絕的。一般情況下，引物都有留樣備份，接到用戶投訴后，都會找出留樣重新定量，一般都沒有問題，如確實存在問題，則可安排重新準備一份。

（2）系統誤差，我們認為10%左右為允許誤差。使用過程中，引物工作濃度范圍很寬，定量上的少許偏差不影響實驗。

（3）用戶收到引物干粉時，打開引物管蓋前沒有離心或其他誤操作導致引物干粉部分丟失。

（4）用戶沒有能夠正確理解引物OD數的含義，沒有能夠正確使用分光光度計，特別是使用微量測定；用戶沒有將OD讀數，正確地轉換成母液中OD數。這種情況比較常見。

例如，驗證標2OD引物量是否準確，簡單的做法是：加入1ml水，徹底溶解混勻后，取100ul,加入900ul水，用光徑為1cm的石英比色杯，波長260nm,此時光吸收的讀數為0.2。