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怎樣才能做好血涂片的制作及染色?

2023-05-26 10:58 作者:洛辰 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
要做好一張血涂片,我們應(yīng)該把它的原理,各種要求和影響因素熟記于心,還要加上適當(dāng)?shù)木毩?xí)。

血涂片的制作

一、原理:將一小滴血液均勻涂在玻片上,呈單層分布,制成薄血片。用瑞氏染液進(jìn)行染色。

二、載波片的要求:制備血涂片使用的載玻片要有很好的清潔度。新的載玻片常有游離堿質(zhì),應(yīng)用清洗液或10% 鹽酸浸泡24小時(shí),然后再?gòu)氐浊逑础S眠^(guò)的載玻片可放入適量肥皂水或洗滌劑的水中煮沸20分鐘,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來(lái)水反復(fù)沖洗,然后擦干備用。

三、操作:

1、用毛細(xì)吸管吸取EDTA抗凝的外周血5-7UL,或者直接采集患者末梢血,將血滴滴至載玻片的一端約1CM處或整片的3/4端。有磨砂片的玻片,可在接近磨砂頭的部位來(lái)水反復(fù)沖洗,然后擦干備用。

2、左手持載玻片,右手持玻片,將推片接近血滴處,然后輕輕接觸血滴并壓在血滴上,使血液呈“ ̄”字型展開(kāi),充滿推片寬度。

3、將推片與載玻片形成30度夾角,用均勻的速度將血向載玻片的另一端推動(dòng)。紅細(xì)胞壓積發(fā)生變化時(shí),應(yīng)適當(dāng)?shù)恼{(diào)整推片與載玻片的角度以及推動(dòng)血液是的速度。標(biāo)準(zhǔn)的血涂片應(yīng)做到頭、體、尾分明,兩邊和兩端留有空隙。

四、方法學(xué)評(píng)價(jià):良好的血涂片是染色后血液形態(tài)學(xué)檢查的前提。薄血膜推片法用血量少、操作簡(jiǎn)單,是應(yīng)用最廣泛的方法。某些抗凝劑可使血細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化,分類時(shí)應(yīng)注意鑒別。根據(jù)不同的需要(如瘧原蟲)可采用厚血涂片法,陽(yáng)性檢出率高。

血涂片染色

1.瑞氏-吉姆薩混合染色能集合瑞氏染色與吉姆薩染色的優(yōu)點(diǎn)。

2.染色方法:標(biāo)記血涂片,將血涂片平放在染色架上,滴加A液覆蓋整個(gè)血膜,30秒-1分鐘后,滴加B液,將A、B液混勻,可用洗耳球輕吹液面,A、B液的比例為1:2,靜置水平位置染色5-10分鐘后,將載玻片拿起,輕輕晃動(dòng),使染料不再附著于血膜上。把水流調(diào)至最小,平持載玻片,與水流方向呈90度,在血膜頭部沖入,向血膜的尾端調(diào)整玻片的角度,直至染料沖干凈,沖洗干凈后的血涂片,放置在血片架上將水自然控干,或傾斜玻片等待自然干燥。

3.判斷染色結(jié)果:在正常情況下,良好的染色結(jié)果為血膜外觀為淡紫紅色;低倍鏡下,細(xì)胞分布均勻;細(xì)胞呈粉紅色,少見(jiàn)染色顆粒,白細(xì)胞胞質(zhì)能顯示各類細(xì)胞的特有色彩,白細(xì)胞核染成紫紅色。
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