蛋白酶抑制劑混合物（100×，哺乳動物樣品提取用）

規格：1ml /5×1ml

儲存條件：-20℃保存，有效期一年。

產品簡介

蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 100×)  (Protease  inhibitor cocktail  for mammalian cell and tissue extracts, 100×) 是一種用于哺乳動物細胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物(100mMAEBSF,  80μM  Aprotinin,5mMBestatin,1.5mME64,2mMLeupeptin and1mMPepstatin A in DMSO)，并提供獨立包裝的0.5MEDTA。

哺乳動物細胞或組織提取物中含有許多內源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易導致提取物中的蛋白降解或去修飾，從而影響后續的蛋白檢測。因此在提取物中添加適當的蛋白酶、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白降解和去修飾的有效方法。

本產品為經優化和測試的用于哺乳動物細胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物，包含了廣譜的絲氨酸、半胱氨酸和酸性蛋白酶抑制劑、以及氨基肽酶抑制劑。

本產品使用便捷，通常以1:100的比例分別把蛋白酶抑制劑混合物和0.5MEDTA加入裂解液中，如用于檢測金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA。

本產品可以有效抑制哺乳動物細胞或組織提取物中的各種蛋白酶活性，如絲氨酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨酸蛋白酶、蘇氨酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨酸蛋白酶不可逆抑制劑，其抑制常數與PMSF和DFP的抑制常數相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作為PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩定性更好。Aprotinin是絲氨酸蛋白酶的競爭性可逆抑制劑；Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑；E64是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制劑；Leupeptin是絲氨酸和半胱氨酸蛋白酶可逆抑制劑；Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制劑；EDTA作為螯合劑是金屬蛋白酶的可逆抑制劑。

一個包裝的本產品通常足夠用于100ml裂解液的配制。

使用方法：

1.本蛋白酶抑制劑混合物為100×的儲存液，使用時按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物)，混勻后即可使用。根據需要，0.5M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中（如用于檢測金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA）。含有蛋白酶抑制劑混合物的裂解液宜現用現配，不宜配制后凍存待后續使用。

2. 待所需的抑制劑添加完畢混勻后，就可以開始進行哺乳動物組織的裂解和蛋白提取。提示：蛋白酶抑制劑混合物盡量避免反復凍融，第一次使用后，可按照每次使用量分裝凍存。family:Arial'>1:100的比例加入到裂解液中。

3. 待所需的抑制劑添加完畢混勻后，就可以開始進行常規細胞或組織的裂解和蛋白提取。提示：蛋白酶抑制劑混合物盡量避免反復凍融，第一次使用后，可按照每次使用量分裝凍存。