臨近開學(xué)，我司技術(shù)支持（兼心理輔導(dǎo)師）經(jīng)常收到這樣焦慮的問(wèn)題：“ 老si，你好，如何才能收獲一盤漂亮的細(xì)胞呢？為啥別人家的細(xì)胞養(yǎng)得那么好呢，我的就一言難盡呢”養(yǎng)出漂亮細(xì)胞 這個(gè)事兒本就說(shuō)來(lái)話長(zhǎng)~之前講過(guò)細(xì)胞貼壁、老化、成團(tuán)、凍存、復(fù)蘇、污染等問(wèn)題 。這次小編又整理了一遍，先看看這些基本點(diǎn)是否都做好了

了解細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性 
不同的細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性不同，了解細(xì)胞生長(zhǎng)習(xí)性，正確計(jì)數(shù)，才能掌握好傳代密度。對(duì)于一般細(xì)胞株，控制在三天一傳，是比較合適的，細(xì)胞不會(huì)太擠也不會(huì)太寂寞。但例如癌細(xì)胞，一發(fā)起瘋來(lái)半天就可以傳代，不及時(shí)換液或擴(kuò)增分分鐘會(huì)餓死或擠死。
所以剛開始接觸一款細(xì)胞，要勤觀察，及時(shí)掌握它的生長(zhǎng)情況。掌握細(xì)胞的生長(zhǎng)節(jié)奏之后可以變成一天一看或兩天三看，畢竟太頻繁的把它從培養(yǎng)箱里拿出來(lái)也不太好。
 

對(duì)大部分細(xì)胞消化來(lái)說(shuō)，可以在消化到差不多快要脫落的時(shí)候，移除大部分胰酶，然后直接加新鮮的培養(yǎng)基將細(xì)胞吹打下來(lái)，省去離心步驟。殘余的胰酶含量很低，所以不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生任何影響。
對(duì)于難消化的細(xì)胞，如HCT15, LS411和KM12，用不含Ca²⁺、Mg²⁺的PBS洗滌一次后，加入稍微多一點(diǎn)胰酶，置37oC徹底消化(一般為幾分鐘)至脫落（一晃細(xì)胞就掉下來(lái)），然后再加含血清的培養(yǎng)基終止胰酶反應(yīng)、離心 (若是無(wú)血清培養(yǎng)基，需改加胰酶抑制劑)。這么做的道理是，細(xì)胞消化不徹底，勢(shì)必會(huì)增加吹打輔助脫落的次數(shù)，而吹打次數(shù)越多，細(xì)胞活性越差。