細胞劃痕實驗（Wound Healing)是一種操作簡單，經濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是，當細胞長到融合成單層狀態時，在融合的單層細胞上人為制造一個空白區域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕”愈合。基本的步驟包括“劃痕”的制造，細胞遷移期間圖像的獲得以及后期數據的處理。

特點：

1. 在一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程。

2. 非常適合研究細胞與胞外基質（ECM），細胞與細胞之間相互作用引起的細胞 遷移。

3. 與包括活細胞成像在內的顯微鏡系統兼容，可用于分析細胞間的相互作用

4. 研究細胞遷移的體外實驗中最簡單的方法。



傳統實驗方法實驗步驟：

1. 培養板接種細胞之前先用marker筆在12孔板背面畫橫線標記（方便拍照時定位同一 個視野）。

2. 細胞消化后接入12孔板，數量以貼壁后鋪滿板底為宜（數量少時可培養一段時間至鋪滿板底）。

3. 細胞鋪滿板底后，用1 ml槍頭垂直于孔板制造細胞劃痕，盡量保證各個劃痕寬度一致。（人工槍頭制造劃痕難以保證劃痕寬度的一致性，影響實驗結果，這也是該方法最大的缺陷。）

4. 吸去細胞培養液，用PBS沖洗孔板三次，洗去劃痕產生的細胞碎片。

5. 加入無血清培養基，拍照記錄。

6. 將培養板放入培養箱培養，每隔4-6小時取出拍照。

7. 根據收集圖片數據分析實驗結果。

Culture Insert方法

1. 準備細胞，培養液，culture Insert。

2. 如圖，將細胞接種于Dish中間的Insert，細胞長滿Insert 區域后用鑷子移除Insert即可產生500 μm寬度的劃痕。

3. 每隔4-6小時拍照記錄。

4. 根據收集圖片數據分析實驗結果。

總結：相比較于傳統的劃痕實驗，Ibidi的設計更科學、重現性更好