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血漿游離血紅蛋白測定實驗說明

2020-05-29 11:22 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑

 

實驗原理

??血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色最終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

 

實驗方法
??材料:
??1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液
??2.1%H2O2
??3.10%醋酸溶液
??4.分光光度計
??方法:
??1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。

??2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。

 

試劑 (ml)
測定管
空白管
2 g/L鄰甲聯苯胺溶液
0.5
0.5
患者血漿
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混勻后室溫放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0

室溫放置10min

 

??3.計算公式

??血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算

??參考范圍:0-40mg/L

 

注意事項
??1.一切容器避免血紅蛋白污染;
??2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
??3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
??4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

 

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