隨著檢測(cè)量的加大，實(shí)驗(yàn)室污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性的問(wèn)題愈發(fā)嚴(yán)重，如幽靈般如影隨行。這其實(shí)也體現(xiàn)了檢測(cè)的特點(diǎn)，不能簡(jiǎn)單用儀器和試劑的品牌價(jià)格來(lái)評(píng)估檢測(cè)質(zhì)量，檢測(cè)的核心是人和嚴(yán)格的試驗(yàn)流程和管理制度。

想絕對(duì)避免核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的污染是不可能的，我們能做的是隨時(shí)保持警惕，盡早發(fā)現(xiàn)，及時(shí)處置，最大程度減少損失。

實(shí)驗(yàn)員發(fā)現(xiàn)在一次PCR實(shí)驗(yàn)中雖然陰性對(duì)照成立，但是4份陰性樣品出現(xiàn)了擴(kuò)增曲線。可以確定實(shí)驗(yàn)中發(fā)生了污染，但是從何時(shí)開(kāi)始污染的？污染源是什么？影響到的試驗(yàn)有多少？我們需要一一排查。
1.停止所有實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，查看當(dāng)天所有的試驗(yàn)結(jié)果，發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)實(shí)驗(yàn)受到了污染。

2.清理試劑準(zhǔn)備區(qū)、核樣本制備區(qū)和擴(kuò)增區(qū)所有開(kāi)封的試劑耗材；

3.離心管架、試管架等可重復(fù)使用的物品浸泡到84消毒液中過(guò)夜，第二天用清水清洗后晾干使用；

4.對(duì)移液器內(nèi)外表面、核酸提取儀內(nèi)部先用酒精擦拭后，再用核酸去除劑擦拭，同時(shí)啟用備用的移液器；

5.對(duì)各區(qū)的生物安全柜、潔凈工作臺(tái)和實(shí)驗(yàn)臺(tái)面先用酒精擦拭后，再用核酸去除劑擦拭；

6.對(duì)實(shí)驗(yàn)室地面用84消毒液進(jìn)行清潔；

7.開(kāi)窗通風(fēng)。

實(shí)驗(yàn)室一旦發(fā)生污染，第一時(shí)間不是糾結(jié)于到底哪里污染了，到底誰(shuí)的責(zé)任導(dǎo)致的污染。絕大多數(shù)時(shí)間我們無(wú)法確定污染源，更不能輕易排除一項(xiàng)污染源。而是第一時(shí)間果斷采取清除污染的措施。這些措施是否有效還需要后續(xù)驗(yàn)證。

污染清除的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

1.在試劑準(zhǔn)備區(qū)的潔凈工作臺(tái)面、樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)部、核酸提取儀內(nèi)部和擴(kuò)增區(qū)臺(tái)面分別放置開(kāi)蓋裝有PBS的離心管，過(guò)夜；

2.用采樣拭子蘸PBS后對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、生物安全柜臺(tái)面和潔凈工作臺(tái)面反復(fù)擦拭后，放入PBS中進(jìn)行洗脫。

3.用采樣拭子蘸PBS后對(duì)移液器的內(nèi)外表面進(jìn)行取樣，取樣后放入PBS中進(jìn)行洗脫。

4.將配液的移液器和加模板的移液器換上無(wú)濾芯槍頭，在PBS中反復(fù)吹吸10次，測(cè)試移液器內(nèi)部是否存在污染。

測(cè)試結(jié)果

1.測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器內(nèi)外表面擦拭拭子為核酸陽(yáng)性，其他檢測(cè)都是陰性。

2.對(duì)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后，第二天對(duì)該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測(cè)，仍有擴(kuò)增分別為39.89和39.63。

3.對(duì)樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器進(jìn)行清潔和擦拭后，過(guò)二天后對(duì)該移液器內(nèi)表面和外表面擦拭拭子進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果為陰性。

持續(xù)監(jiān)測(cè)

本次污染事件中從周五發(fā)現(xiàn)，周一進(jìn)行清理測(cè)試后，周二即完全恢復(fù)了實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。雖然可以確定的是樣本制備區(qū)的生物安全柜內(nèi)加模板的移液器發(fā)生了污染。但是由于可能造成污染的因素很多，移液器是否是唯一的污染因素我們很難確定。后續(xù)的幾天仍然在檢測(cè)中增加陰性對(duì)照，持續(xù)對(duì)環(huán)境等樣品進(jìn)行監(jiān)測(cè)，確保污染被徹底清除。

很多檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室被持續(xù)的不定期核酸污染所困擾，很重要的原因是未能及時(shí)發(fā)現(xiàn)污染并在第一時(shí)間徹底的處理。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)該結(jié)合自己實(shí)驗(yàn)室的情況建立規(guī)范的污染處置規(guī)程，確保在下一次污染發(fā)生時(shí)能盡早盡快解決。