一、載體與質(zhì)粒的區(qū)別

1.載體（Vector）的概念
把一個目的基因通過基因工程手段送到生物細胞（受體細胞），需要運載工具（交通工具）攜帶外源基因進入受體細胞，這種運載工具就叫做載體（vector）。
基因工程上所用的載體是一類能自我復(fù)制的DNA分子，其中的一段DNA被切除而不影響其復(fù)制，可用以置換或插入外源(目的) DNA而將目的DNA帶入宿主細胞。常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體、病毒等。

載體的功能及特征：
運送外源基因高效轉(zhuǎn)入受體細胞
為外源基因提供復(fù)制能力或整合能力
為外源基因的擴增或表達提供必要的條件

載體應(yīng)具備的條件：
具有針對受體細胞的親緣性或親和性（可轉(zhuǎn)移性）
具有與特定受體細胞相適應(yīng)的復(fù)制位點或整合位點
具有較高的外源DNA的載裝能力
具有多具有合適的篩選標記
種單一的核酸內(nèi)切酶識別切割位點
2.質(zhì)粒（Plasmid）的概念
質(zhì)粒是生物細胞內(nèi)固有的、能獨立于寄主染色體而自主復(fù)制、并被穩(wěn)定遺傳的一類核酸分子。質(zhì)粒常見于原核細菌和真菌中，絕大多數(shù)的質(zhì)粒是DNA型的，少部分為RNA型。天然DNA質(zhì)粒大都具有共價、封閉、環(huán)狀的分子結(jié)構(gòu)，其分子量范圍：1-300 kb。細菌質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體。

質(zhì)粒的基本特征：
質(zhì)粒的自主復(fù)制性：質(zhì)粒能利用寄主細胞的DNA復(fù)制系統(tǒng)進行自主復(fù)制，其DNA上的復(fù)制子結(jié)構(gòu)決定了質(zhì)粒與寄主的對應(yīng)關(guān)系，并根據(jù)在每個細胞中的分子數(shù)（拷貝數(shù)）多寡，質(zhì)粒可分為兩大復(fù)制類型：

嚴緊型復(fù)制控制的質(zhì)粒 1 - 3 拷貝
松弛型復(fù)制控制的質(zhì)粒 10 - 60 拷貝
質(zhì)粒的不相容性：任何兩種含有相似復(fù)制子結(jié)構(gòu)的不同質(zhì)粒，不能同時存在于一個細胞中，這種現(xiàn)象稱為質(zhì)粒的不相容性，不相容性的質(zhì)粒組成不相容性群。以大腸桿菌的質(zhì)粒為例：
ColE1、pMB1 擁有相似的復(fù)制子結(jié)構(gòu)，彼此不相容。
pSC101、F、RP4 擁有相似的復(fù)制子結(jié)構(gòu)，彼此不相容。
p15A及其衍生質(zhì)粒擁有相似的復(fù)制子結(jié)構(gòu)，彼此不相容。

質(zhì)粒的可轉(zhuǎn)移性：革蘭氏陰性菌的質(zhì)?？煞殖蓛纱箢悾?br> 接合型質(zhì)粒——能在天然條件下自發(fā)地從一個細胞轉(zhuǎn)移到另一個細胞（接合作用），如F、Col、R質(zhì)粒等。
非接合型質(zhì)?！荒茉谔烊粭l件下獨立地發(fā)生接合作用如Col、R的其它成員。值得注意的是，某些非接合型質(zhì)粒（ColE1）在接合型質(zhì)粒的存在和協(xié)助下，也能發(fā)生DNA轉(zhuǎn)移，這個過程由 bom 和mob 基因決定攜帶特殊的遺傳標記：野生型的質(zhì)粒DNA上往往攜帶一個或多個遺傳標記基因，這使得寄主生物產(chǎn)生正常生長非必需的附加性狀，包括：

物質(zhì)抗性：抗生素、重金屬離子、毒性陰離子、有機物等。
物質(zhì)合成：抗生素、細菌毒素、有機堿等。
這些標記基因?qū)NA重組分子的篩選具有重要意義。


二、質(zhì)粒載體的分類
天然存在的野生型質(zhì)粒由于分子量大、拷貝數(shù)低、單一酶切位點少、遺傳標記不理想等缺陷，不能滿足克隆載體的要求，因此往往需要以多種野生型質(zhì)粒為基礎(chǔ)進行人工構(gòu)建。
質(zhì)粒載體按功能分：

克隆載體—都有一個松弛的復(fù)制子，能帶動外源基因，在宿主細胞中復(fù)制擴增。它是用來克隆和擴增DNA片段（基因）的載體。
表達載體—具有克隆載體的基本元件（ori,Ampr,Mcs等）還具有轉(zhuǎn)錄/翻譯所必需的DNA順序的載體。

質(zhì)粒載體按進入受體細胞類型分：
原核載體
真核載體
穿梭載體（sbuttle vector）指在兩種宿主生物體內(nèi)復(fù)制的載體分子，因而可以運載目的基因（穿梭往返兩種生物之間）。穿梭質(zhì)粒含原核和真核生物2個復(fù)制子，以確保兩類細胞中都能擴增。

質(zhì)粒載體按功能分：
高拷貝質(zhì)粒：突變拷貝數(shù)控制基因 拷貝數(shù)1000-3000擴增基因
低拷貝質(zhì)粒：來自pSC101 拷貝數(shù)小于10 表達某些毒性基因
溫敏質(zhì)粒：在不同溫度下表現(xiàn)出拷貝數(shù)、整合等不同性質(zhì)
測序質(zhì)粒：含有測序通用引物互補序列和多酶接頭polylinker
整合質(zhì)粒：裝有整合促進基因及位點 便于外源基因的整合
探針質(zhì)粒：裝有報告基因 便于啟動子等元件的克隆篩選