麻風桿菌染色液(改良Wade-Fite法)操作步驟
2021-10-27 13:45 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:麻風桿菌染色液(改良Wade-Fite法)
規格:3×50ml
分類:微生物染色
儲存條件:室溫,避光,6個月
用途:抗酸菌染色,特別適用于麻風桿菌染色
注意事項:抗酸菌(麻風桿菌,結核桿菌)染色呈紅色,胞核呈藍色
產品簡介:抗酸桿菌屬于分枝桿菌,由于分支桿菌的細胞壁內含有大量脂質包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色。傳統的染色方法要經過加熱和延長染色時間來促使其著色。分枝桿菌中的分枝菌酸與染料一旦結合后,就很難被酸性脫色液脫色,故名抗酸染色。其中最具代表性是結核桿菌Ziehl-Neelsen染色,該法是WHO推薦熱染的方法。Kinyoun染色屬于冷染色法,相對較抗酸熱染液安全。
麻風桿菌染色液是在抗酸桿菌Ziehl-Neelsen染色法基礎上由Wade-Fite進一步改良而來。其染色原理是在室溫條件下分枝菌酸與復紅結合成復合物,經蘇木素復染后,分枝桿菌仍然為紅色,而其他細菌及背景中的物質為藍色。該染色法較Ziehl-Neelsen染色和Kinyoun染色更適合于顯示麻風桿菌,僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、接種環挑取待檢樣本,涂布于載玻片上,自然干燥。
2、滴加Wade-Fite復紅染色液,室溫染色5~10min。
3、流水沖洗多余染色液。
4、用Wade-Fite脫色液脫色至無紅色為止。
5、流水沖洗5min。
6、用Mayer蘇木素染色液淺染細胞核。
7、流水沖洗5min。
8、輕輕吸干水分,自然干燥。
9、油鏡鏡檢。
染色結果:
抗酸菌(麻風桿菌、結核桿菌) 紅色
非抗酸菌、細胞、背景 藍色
注意事項:
1、每次使用后蓋緊試劑瓶,以防試劑揮發和污染。
2、Wade-Fite復紅染色液易出現沉淀,可小心吸去上清液滴染。
3、上述試劑均對人體有刺激性,請注意適當防護。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。