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實驗動物分組和標記編號方法

2021-11-29 11:37 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
一、分組

1、分組原則
實驗動物分組應嚴格按照隨機分組的原則進行,使每只動物都有同等機會被分配到各個實驗組中去,盡量避免人為因素對實驗造成的影響。

2、建立對照組
實驗動物分組時應特別注意建立對照組。對照組可分自身對照組和平行對照組。

2.1自身對照組
自身對照是把實驗動物本身在動物實驗前、后兩階段的各項相關數據,分別作為對照組和實驗組的結果并進行統計學處理。

2.2平行對照組
平行對照組分正對照組和負對照組(空白對照組)兩種。正對照組是對實驗動物實施與實驗動物相同但排除了所要觀察的目的因子(如治療手段或藥物)的處理,負對照組則不作任何處理,這種方法就是平行對照組。例如要觀察某種藥物的藥效,對實驗組動物采用肌肉注射的給藥方法;正對照組動物同樣進行肌肉注射,但注射的不是藥物而是同等劑量的生理鹽水,以便排除肌肉注射生理鹽水可能產生的影響;負對照組動物則不進行肌肉注射,并與實驗組動物和正對照組動物在相同的環境和條件下飼養,作為空白對照。

二、標記編號

對隨機分組后的實驗動物進行標記編號,是動物實驗準備工作中相當重要的一項工作。標記編號方法應保證編號不對動物生理或實驗反應產生影響,且號碼清楚、易認、耐久和適用。目前常用的標記編號方法有染色法、耳孔法、烙印法、掛牌法等標記編號方式。此外還有針刺法、斷趾編號法、剪尾編號法、被毛剪號法、籠子編號法等。

1、染色法
染色法是用化學藥品在實驗動物身體明顯的部位,如被毛、四肢等處進行涂染,以染色部位、顏色不同來標記區分實驗動物,是最常用、最易掌握的經濟犯罪分子方法。

1.1 常用染色劑
(1)3% ~ 5%苦味酸溶液,可染成黃色。
(2)0.5% 中性紅或品紅溶液,可染成紅色。
(3)2%硝酸銀溶液,可染成咖啡色(涂染后在可見光下暴露十分鐘)。
(4)煤焦油酒精溶液,可染成黑色。

2.2 染色方法
染色法適用于被毛白色的實驗動物如大白鼠、小白鼠等。

2.2.1單色涂染法
單色涂染法是用單一顏色的染色劑涂染實驗動物不同部位的方法。常規的涂染順序是從左到右、從上到下。左前肢為1號、左側腹部2號、左后肢3號、頭部4號、背部5號、尾根部6號、右前肢為7、右側腹部8號、右后肢9號、不作染色標記為10號。此法簡單、易認,在每組實驗動物不超過10只的情況下適用。

2.2.2色涂染法
雙色涂染法是采用兩種顏色同時進行染色標記的方法。例如用苦味酸(黃色)染色標記作為個位數,用品紅(紅色)染色標記作為十位數。個位數的染色標記方法同單色涂染法;十位數的染色標記方法參照單色涂染法,即左前肢為10號、左側腹部20號、左后肢30號、頭部4 0號、背部50號、尾根部60號、右前肢70號、右側腹部80號、右后肢90號,第100號不作染色標記。比如標記第12號實驗動物,在其左前肢涂染品紅(紅色),在其左側腹部涂上苦味酸(黃色)即可。雙色法色法可標記100位以內的號碼。

2.2.3直接標號法
直接標號法是使用染色劑直接在實驗動物被毛、肢體上編寫號碼的方法。實驗動物太小或號碼位數太多時,不宜采用此方法。染色法雖然簡單方便,不會給實驗動物造成損傷和痛苦,但是長時間實驗會使涂染劑自行褪色,或由于實驗動物互相嬉鬧、舔毛、摩擦、換毛、糞尿和飲水浸濕被毛等原因,易造成染色標記模糊不清,因而染色法對慢性實驗不適用。如果所做慢性實驗只能采用此種染色方法,則應注意不斷地補充和加深染色。另外,常用染色劑的毒性對實驗動物的影響也是需要注意的一個問題。

2.耳孔法
耳孔法是用打孔機直接在實驗動物的耳朵上打孔編號,根據打在動物耳朵上的部位和孔的多少,來區分實驗動物的方法。用打孔機在耳朵打孔后,必須用消毒過的滑石粉抹在打孔局部,以免傷口愈合過程中將耳孔閉合。耳孔法可標記三位數之內的號碼。另一種耳孔法是用剪刀在實驗動物的耳郭上剪缺口的方法,作為區分實驗動物的標記。

3.烙印法
烙印法是直接把標記編號烙印在實驗動物身體上的方法,尤如蓋印章一樣。烙印方法有兩種,對犬等大動物,可將標記號碼烙印在其皮膚上(如耳、面、鼻、四肢等部位),對家兔、豚鼠等動物,可用數字號碼鉗在其耳朵上刺上號碼;烙印完成后,傷口涂抹酒精黑墨等顏料,即可清楚讀出號碼。烙印法對實驗成績動物會造成輕微損傷,操作時宜輕巧、敏捷,必要時麻醉,以減少痛苦。

4.掛牌法
掛牌法是將編好的號碼烙印在金屬牌上,掛在實驗動物頸部、耳部、肢體或籠具上,用來區別實驗動物的一種方法。金屬牌應選用不生銹、刺激小的金屬材料,制成輕巧、美觀的小牌子。

實驗人員可根據實驗動物品種、實驗類型及實驗方式,選擇合適的標記編號方法。一般來說,大、小鼠多采用染色法,家兔宜使用耳孔法,犬、猴、貓較適合掛牌法,犬還可用烙印法。
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