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液相使用小雷區,你避開了嗎?

2022-05-24 13:53 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
液相操作中,有一些小細節上的誤操作在精益求精的實驗室人看來是要盡可能避免的,細節雖小,影響很大。這就帶各位小伙伴們看一看,這些錯誤你們有犯過嗎?犯過不怕,記得改正哦~
加入有機相之后再測量流動相的PH值

作為液相色譜的基礎,流動相的各項參數是保障實驗質量的重中之重,特別是PH值。通常情況下對流動相PH值的測量是測量水相中的PH值參數,而在加入有機相后PH測量的PH值是會產生誤差的。因為每一次加入的有機相并不能保證完全的同質同量,從而影響實驗的準確度。

測量流動相的PH值,是測量水相中的PH值參數。有機相加入之后PH值參數的測量就和之前有誤差。

緩沖鹽使用不當

在流動相中,加入緩沖鹽可以控制和修正流動相中的PH值變化。樣品的機制,空氣中的CO2等氣體以及水中的雜質都能夠造成流動相PH值變化進而影響樣品的保留、峰形、峰面積參數。而每一種緩沖鹽都只能在一定的PH值范圍內提供了最佳的pH穩定性。而在這個范圍外,該緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。所以需要在流動相中加入合適的緩沖鹽,要么在正確的范圍內使用緩沖鹽,要么選擇一個能夠完全覆蓋所需pH值的緩沖鹽。

最后,緩沖鹽的添加也是具有一定的要求的,如果將水相的緩沖溶液加入到有機相中,會大大增加緩沖鹽析出的風險。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯,但會對儀器的各個部件都會產生一定影響。長此以往不僅會導致實驗結果不準確,更會有可能導致儀器損傷甚至損壞。

直接用純有機溶劑沖系統

如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液,而這次沒有經過調查就直接在B通道使用了純的有機溶劑,那么就會造成該通道緩沖鹽析出、出現堵塞等風險。

僅使用超聲來給流動相脫氣

超聲脫氣有一定的脫氣作用,但完全脫氣的效果并不理想。

所以在此建議使用真空脫氣機進行在線脫氣。

梯度洗脫時從流動相比例從0%開始

現在的液相色譜能夠非常高效的進行在線脫氣和流動相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始,會有比較大的出現氣泡和沉淀的風險。
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