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弧菌顯色培養(yǎng)基實驗原理

2022-07-01 15:26 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:弧菌顯色培養(yǎng)基
英文名稱:Vibrio Chromogenic Medium
供應商:遠慕生物
產品規(guī)格:100g
保質期:二年
產品用途:用于弧菌的顯色培養(yǎng),副溶血性弧菌顯藍綠色,霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色。

簡介:弧菌顯色培養(yǎng)基用于食品、海產品、病人糞便樣品和水產品中副溶血性弧菌的快速檢測。副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大,霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色;其它細菌絕大部分被抑制。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結果,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。

成份(g/L)
特殊營養(yǎng)物質  75.0
混合顯色劑  4.45
瓊脂  15.0
pH 8.6±0.1  25℃
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結果。 

用法
稱取本品 18.9g 加入 200ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸3-5次。冷卻至 45-50℃ 時,傾入無菌平皿。
注意:制備好的培養(yǎng)基表面不能太干燥。

原理
利用弧菌自身代謝產生的酶與相應顯色底物反應使菌落顯色,以區(qū)分目標菌與非目標菌。顯色底物是由產色因子和微生物部分可代謝物質組成,在特異性酶作用下,游離出產色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取 1ml 樣品液加入 9ml SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中,36±1℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時;
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到弧菌顯色培養(yǎng)基上,做 2 個平板;
4、36±1℃培養(yǎng) 18-24h,副溶血性弧菌顯藍綠色,菌落比較大;霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色,其它細菌絕大部被抑制;
5、對可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上,36±1℃ 培養(yǎng) 12-16 小時,挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗。

質量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈淡粉色至黃色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗
在36±1℃培養(yǎng)18-24h小時

質控菌株

 菌株編號

 生長情況

 菌落顏色

副溶血性弧菌

ATCC 17802

+++

藍綠色,菌落比較大

 金黃色葡萄球菌

ATCC 25923

-

 -

大腸桿菌

ATCC 25922

-

 -

溶藻弧菌

ATCC 17749

+++

淡黃色或米黃色

非01群霍亂弧菌

 

 +++

 紫紅色

創(chuàng)傷弧菌

ATCC 27562

+++

紫紅色


方法的局限性
本培養(yǎng)基不能直接鑒定霍亂弧菌,副溶血性弧菌的特異性可達 95%,準確性非常高,有時可能需做其它補充試驗。

典型特征
典型副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大,霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色

貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。

失效
干燥培養(yǎng)基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
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