中文名稱:F10(Ham)液體培養基

供應商：遠慕生物

產品規格:500ml

產品成分:碳水、含氮、無機鹽、維生素、水(具體信息請來電詳詢)

簡介：F10（Ham）液體培養基又叫HAM’S/F?10培養基，含146mg/L L-谷氨酰胺，1100 mg/L D-葡萄糖，110mg/L丙酮酸鈉，1200mg/L碳酸氫鈉。pH值7.2-7.4，用于細胞培養。保存條件：2-8°C，一年有效。

應用：F10（Ham）液體培養基可用于制備一種新生豬胰島細胞培養基：

目前的豬胰島細胞培養體系就是從動物體中取出胰腺分離出胰島細胞，并將其培養于CMRL1066，RPMI等培養基內維持其生長或誘導其定向分化的過程，培養的胰島細胞一般用于移植手術治療糖尿病。

現今有多種新生豬胰島細胞培養方法，一般采用1?5天的新生豬，解剖取胰腺，破碎后用膠原酶消化成細胞團，置于細胞培養基中培養3?5天，但純化獲得的有活性功能胰島細胞的量各不相同（2000IEQ/g?4000IEQ/g），培養胰島細胞的純度也各有差別（70?90%）。胰島細胞即使在低溫培養中也會因細胞凋亡而產生丟失，尤其是β細胞，并且培養過程長短難于選擇，培養時間短則β細胞不能發育成熟，培養時間過長則會有大量胰島細胞因凋亡產生丟失，一般回收率只有60%左右，且由于β細胞凋亡使得同等量胰島細胞胰島素分泌量減少（insulin/DNA值為49.00±1.95mIU/g）。培養過程難于清除污染，易于給后續的移植過程帶來炎癥反應。現今沒有能大量提供高純度有活性并且穩定產量的胰島細胞培養方法，所以如何通過建立優化的培養基成分以及培養方式成為胰島細胞培養最迫切的問題。

CN201210330427.9建立一種改良的能大量提供有活性并且有穩定產量的新生豬胰島細胞培養體系。本發明的新生豬胰島細胞培養基為，向HAM’S/F?10培養基中添加細胞凋亡抑制劑 Z?VAD?FMK 10微摩爾～50微摩爾，占培養基體積百分比15%～25%的人血白蛋白和占培養基體積百分比為5%～15%豬血清，以及每升培養基中加入6～10mmol的丙酮酸鈉。本發明使用過程是，室溫無菌條件下，將已分離純化的（5000～10000IEQ）豬胰島細胞懸液加入本發明所述的培養基中，在37℃、5%CO2、95%空氣培養箱內培養，制備的細胞在第一天更換培養皿及培養基，此后每隔一天更換一次。該優化培養基降低了細胞凋亡率，增加了培養細胞回收率，延長了細胞培養時間，使得培養后胰島細胞較短時間培養的更為成熟，相同量胰島細胞的胰島素分泌量顯著提升，建立了穩定高效，細胞獲得量大的長期胰島細胞長期培養體系。

與以往技術相比的有益效果：

1.細胞凋亡下降，回收率增加。

2.培養時間延長，培養細胞有敏感葡萄糖刺激應答，功能比一般培養的胰島細胞要成熟。

3.相同量的胰島細胞胰島素分泌量增加。4胰島β細胞活力增加。