產品名稱:EDTA細胞消化液(0.04%)
規格:100ml/500ml
供應商:上海遠慕生物
分類:細胞培養
儲存條件:室溫,12個月
用途:細胞消化液的一種,含有pbs和edta,不含胰蛋白酶,對細胞損傷較小。
注意事項:無菌溶液。
在組織細胞的體外培養和傳代細胞培養以及原代細胞培養中的組織細胞分散(將組織塊制備成單個細胞懸液)中,貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶,EDTA(乙二胺四乙酸二鈉)等,其功能主要是通過鏊合鈣離子等,改變細胞間的連接,使組織或細胞分散成單個細胞,制成細胞懸液用于進一步的實驗。
EDTA細胞消化液(EDTA Solution)采用進口EDTA為主要原料,溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中,經滅菌處理,可以直接用于培養細胞的消化、傳代,或某些組織的消化。本產品具有使用方便、質量穩定、消化快速、安全無毒、細胞狀態好等特點,可單獨使用,也可與胰蛋白酶細胞消化液聯合使用,通常室溫消化2-5分鐘左右就可以消化下大多數貼壁細胞。EDTA細胞消化液分為含酚紅和不含酚紅2類產品,采購時請務必注明。
使用說明:臨用前,取出置37℃水浴或室溫中預熱,取適量加入細胞瓶中,置37℃消化2~5min。
貼壁細胞的消化:貼壁細胞在培養瓶中長成致密單層后,繼續生長的空間不足,培養基中的營養成份也消耗較多,同時代謝廢物也有較多堆積,需要分瓶培養,擴增、傳代。對于懸浮生長細胞和貼壁不太緊的細胞如SP2/0,293等,可直接吹散后分瓶;而對于貼壁較緊的細胞如Hela,HepG2,CHO等,則需要以細胞消化液消化后,才能脫落和分散,擴瓶。一般操作過程為(以下操作均必須嚴格按無菌操作的要求進行):
·將長成致密單層細胞的細胞瓶中原來的培養液棄去;
·加入0.25%胰酶溶液,視細胞瓶的大小加入體積為0.5ml或更多(依培養器皿的大小而定),以使充分浸潤;
·一般消化時間約為1至3分鐘,肉眼觀察瓶底由半透明(細胞單層連接成片)轉為點狀透明(出現細小空隙)時,棄去細胞消化液,并加入適量的完全培養液終止消化,吹打分散;
·視實驗目的分入多瓶繼續培養,一般比例為一傳二到一傳四;或接種與微孔板中。
組織的消化:
不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織并成單個細胞懸液為宜,EDTA單獨用于組織細胞的消化效果多不理想,通常要與其他消化液聯合使用。
注意事項
1.避免接觸眼睛、呼吸系統、皮膚;若誤接觸眼睛,立即用水沖洗或向醫生咨詢;
2.由于組織或細胞性質不同,實驗人員應依據具體情況,確定**消化時間;消化細胞時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁和生長狀況;
3.本產品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被微生物污染,大包裝,建議無菌分裝保存;
4.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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Hoagland's(霍格蘭氏)營養液-大量元素(100×) (可配10升)
Hoagland's(霍格蘭氏)營養液-大量元素(100×) (可配50升)
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